大孔树脂分离纯化黄连总生物碱型号的筛选.docxVIP

大孔树脂分离纯化黄连总生物碱型号的筛选 【摘要】【目的】从众多的树脂型号中筛选出分离纯化 黄连总生物碱效果较好的一种。【方法】运用AB 8、HP20、 LD605、ADS 3、ADS 5、D151、DA 201、XAD7、NKA 99种树脂，以黄连总生物碱的吸附率和解吸率为指标进 行初筛，并以盐酸小漿碱的解吸率为指标，进一步的筛选。 【结果】9种树脂中，ADS 3树脂的吸附和解吸能力均较 强，总生物碱的吸附率达到9 7 26%,解吸率达到84 82%O盐酸小漿碱的解吸量达到9 311mgo【结论】ADS 3树脂对总生物碱及盐酸小漿碱的吸附和解吸性能都较好， 可用于黄连总生物碱的分离纯化。 【关键词】黄连/分离和提纯；总生物碱/分析；盐酸小 漿碱/分析；大孔树脂 黄连是毛萇科植物黄连的根茎，有效成分主要是生物 碱，其中小漿碱的含量最高，可达10%左右，而且以盐酸盐 的状态存在于黄连中［1］。黄连中的生物碱大多是季鞍型生 物碱，在水中溶解度大，有一定的极性［1］。在运用大孔树 脂分离纯化中药有效成分时，树脂的极性和所含的官能团 对化合物的吸附能力有很大的影响。因此，对于中药有效 成分或有效部位的纯化，树脂型号的选择非常重要。 根据已有的报道，目前常用于生物碱分离纯化的树脂 型号有DA 201、NKA 9、D101、LD 605、AB 8、D 151、 XAD4、XAD7、ADS 3、ADS 5、HP20 [27]。其中，DI 01、 HP20、XA D4实为同一种树脂。故本研究将从DA 2 01、 NKA 9、LD605、AB 8、D151、XAD7、ADS 3、ADS 5、HP209种树脂中筛选一种分离效果较好的型号，现报道 如下。 1仪器与材料 L C lOATvppl us高效液相色谱仪（日本岛津），SPD lOAvpplus紫外一可见检测器，紫外一可见分光光度计（T hermoElect roncorpora tion）, UVmi ni 1240 紫夕卜分 光光度计。AB 8、HP20、LD605、ADS 3、ADS 5、 D151均由天津欧瑞生物科技有限公司提供，DA 201、 NKA 9由沧州宝恩化工有限公司提供，XAD7由美国哈门 罗斯公司提供，黄连药材由北京同仁堂（毫州）饮片有限责 任公司提供（经广州中医药大学中药鉴定教研室黄海波老师 鉴定为毛萇科植物黄连Coptischi nensisFran ch 的干燥 根茎），盐酸小漿碱标准品（批号：110713 X X09）由中国 药品生物制品检定所提供。 2方法与结果 2 1黄连提取液中总生物碱的测定 2 1 1标准曲线的绘制 2111检测波长的确定分别吸取盐酸小漿碱标 准品溶液和经适当稀释后的黄连提取液，在20 0?600nm之 间进行波长扫描，两者在3 47nm波长处呈现共有吸收峰， 故确定检测波长为347nm0见图1。 2 1 1 2标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的 盐酸小漿碱对照品11 10mg,置50mL量瓶中，用0 05m O1/LH2S04溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取 盐酸小漿碱对照品溶液0 2、0 5、0 8、1 0、1 5、2 OmL,分别置 50m L 量瓶中，力口 0 05 mol/LH2S04 稀释至刻度，摇匀，在347nm波长处测定吸光度。以吸光度 X为横坐标，质量浓度Y为纵坐标，进行线性回归。结果表 明在0 00 176?11 76m g/mL范围内盐酸小漿碱的浓度 与吸光度呈良好的线性关系，其回归方程为：Y=0 0 162X-0 000 04, r-0 999 9。 XX年第27卷广州中医药大学学报2 1 2黄连提取 液中总生物碱的测定称取黄连药材10g,加8倍量体积分数 60%乙醇回流提取3次，每次lh,合并提取液。将提取液移 至1000m L的容量瓶中，加体积分数60%乙醇定容至刻度。 取ImL样品，置25mL量瓶中，加0 05mol/LH 2S04定容 至刻度。取2 5mL上述样品，置25mL量瓶中，加0 05mol/L H2S04定容至刻度。在347nm处测吸光度为0 297o采用此法提取得到的总生物碱为0 119g/g药材。 2 2大孔树脂型号的初筛 2 2 1供试品溶液的制备取黄连粉末10 0 g,加 8倍量的体积分数60%的乙醇，加热回流提取3次，每次1 h,合并3次提取液，过滤。滤液减压真空浓缩至无醇味。 将提取液转移至1000mL的容量瓶，加蒸馆水定容至刻度， 备用。取lmL±述提取液，置于2 5mL的容量瓶中，用0 05mol/L的H2S04定容至刻度。取上述稀释液2 5 mL,置 于25mL的容量瓶中，用0 05 mol/LH2S04定容至刻度。 在347 nm波长下测得吸光度为0 285。计算得提