细胞增殖与其调控要求.ppt

* * * * * * * 细胞类型 细胞周期时间 两栖类早期胚胎细胞 30分钟 酵母细胞 1.5---3小时 小肠上皮细胞 约12小时 体外培养的哺乳类 上皮细胞 约20小时 人类肝细胞 约1年 Experimental demonstration of the coordinated Synthesis of DNA and hitones. * *  . * * 稻蝗虫精母细胞减数分裂前期I 细：细/满/乱 终： 染色体排列 在核膜内侧 的球面上 双： 0、8等形态 染色体 粗：“成对”深入 偶：开始联会， 核膜下“成对” a. Electron micrograph of SC of human pachytene bivalent.(K: kinetochore; arrow: recombination nodules);b. Schematic diagram of SC; c. Electron micrograph of SC after treatment with DNase to remove chromasomal fibers. Visible evidence of crossing over * * 人M期细胞与袋鼠（Ptk）G1、S、G2期细胞融合诱导PCC：提示M期细胞存在诱导PCC的因子； 处于第六期的爪蟾卵母细胞（RD前期I），具GV。 注射实验表明：孕酮诱导卵母细胞成熟；成熟卵细胞质中，含有卵母细胞成熟的因子，称做MPF。1988年Maller实验室分离纯化了MPF，证明它主要含有p32和p45两种蛋白，二者结合后，表现出蛋白激酶的活性。 CAK=CDK1-Activiting Kinase * * Cyclin-CDK对细胞周期的调控 G1期 S期 G2 /M期 M期 * * G1期 cyclin CDK Cyclin-CDK 作用时相 作用特点 Cyclin D CDK 4，6 G1-CDK G1中、晚期 G1晚期跨过检查点向S期转换 Cyclin E CDK 2 G1/S-CDK G1中、晚期 G1晚期跨过检查点向S期转换 Cyclin A CDK 2 S-CDK G1晚期 G1晚期跨过检查点向S期转换 Cyclin B CDK 1 M-CDK G2期，M期 磷酸化多种与有丝分裂有关的蛋白质，促进G2期向M期转换 * * S期 G1-CDK复合物中的CDK发生不可逆讲解，使已经进入S期的细胞无法向G1期逆转 S-CDK迅速活化，启动DNA复制，并阻止已复制的DNA再复制 * * G2 /M期 M-CDK组装形成，又称为MPF(促成熟因子) 此时，cyclin达到峰值，故MPF活性显著增高，促进G2期向M期转换 * * M期 M期细胞形态结构改变，中期向后期转换均与MPF有关 MPF通过APC(后期促进复合物)、分离酶促进细胞向后期转变 后期末，细胞失去MPF的活性，组蛋白及核纤层去磷酸化，使细胞形态逆转到分裂早期，即核膜组装、染色体去凝集、子核形成 MPF失活也促进胞质分裂，形成子细胞 * * 在MPF的发现过程中的重要事件 Johnson和Rao进行的实验及其发现 Mausi利用爪蟾卵母细胞进行的实验及MPF的提出 Hartwell等人利用芽殖酵母进行的实验及其发现 P. Nurse等人利用裂殖酵母进行的实验及其发现 Tim Hunt利用海胆卵细胞进行的实验及其发现 结论 * * 周期蛋白 人们从不同生物中分离克隆出了数十种周期蛋白，这些周期蛋白不细胞内表达的时期有所不同。 G1期表达并起作用的称为G1期周期蛋白，主要有E和D；M期表达并起作用的称为M期周期蛋白，主要有B和A。 各种周期蛋白之间的共性： 1、含有一段保守序列，称为周期蛋白框，这一序列是它和催化亚基结合的位点，称为周期蛋白框； 2、A和B在N端具有破坏框，其余分子在C端具有PEST序列，这些均与周期蛋白的降解相关。 * * CDK 人们从不同物种成功分离到了十多个cdc相关基因，它们编码的产物共同之处在于： 含有一段类似的AA序列，介导CDK与cyclin结合，并将周期蛋白作为其调节亚单位，进而表现出蛋白激酶的活性。 这些蛋白被称为周期蛋白依赖性蛋白激酶（cyclin-dependent kinase），简称CDK。由于cdc2是第一个发现的cdc蛋白，因此被命名为CDK1。 CDK是周期调控的核心，影响其活性的因素包括：周期蛋白，CDK磷酸化状态及CDK抑制因子等。 * * * * 周期蛋白 cyclin-CDK复合物形成暴露出活性CDK位点。细胞中cyclin达到一定浓度才能与CDK结合；cyclin讲解后，CDK失活。因