核酸的化学教学课件.ppt

* mRNA的功能：合成蛋白质的模板（密码子） * 非信使小RNA small non-messenger RNA, snmRNA 种类 英文名称 生物学功能 核内小RNA Small nuclear RNA(snRNA) 参与hnRNA剪接，包括U1，U2，U4，U5, U6 核仁小RNA Small nucleolar RNA(snoRNA) 参与rRNA核糖C-2’的甲基化 胞质小RNA Small cytoplasmic RNA(scRNA) 催化小RNA Small catalytic RNA RNA剪接，包括核酶等 微小RNA microRNA 转录后调控 小干扰RNA Small interference RNA (siRNA) 对外源入侵RNA基因的切割 * microRNA 非编码RNA，22个核苷酸左右； 在转录后水平调节基因表达。 * 第五节 核酸的理化性质和应用 一、核酸的酸碱性质 核酸通常显酸性，在中性或偏碱性条件下带负电荷 电泳：由负极向正极泳动 沉淀：盐溶液中金属离子中和负电荷 * 二、核酸的高分子性质 粘度大（DNA RNA） 核酸发生变性或水解时，粘度变小 不同种类的核酸分子其分子量不同，形状不同 分离：电泳、凝胶过滤、超速离心 三、核酸的紫外吸收（ UV absorption） 核酸分子中的碱基都有共轭双键，具有紫外吸收性质 吸收峰在260nm, 可用于核酸的定量 * 腺嘌呤 吸 光 度 * 四、DNA的变性、复性与杂交 在某些理化因素作用下，DNA分子互补碱基对之间 氢键断裂，DNA双螺旋打开，变为单链。 因素 加热、酸、碱、有机溶剂 理化性质改变 高色效应（A260增加） 粘度降低 沉降速度增加 （一）DNA变性 denaturation * DNA的热变性 加热引起的DNA变性 DNA解链或溶解 融解温度（melting temperature, Tm） DNA加热变性时，A260为最大值的一半时的解链温度。 A260 解链温度（oC） Tm * Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关 G+C的含量越高，则Tm越高 * （二） DNA的复性（退火，annealing） 变性DNA在适当条件下，两条互补链可重新恢复天然的 双螺旋结构，这一现象称复性。 * （三） 核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization) 不同的DNA单链分子或DNA、RNA分子放在一起，若二者序列完全互补或部分互补，则可形成杂合双链分子。 * 分子杂交技术 Southern Blot（DNA-DNA杂交） Northern Blot （DNA-RNA杂交） * 本章重点内容 核酸的种类及主要功能 （DNA、RNA） 核酸的分子组成 （核苷酸、磷酸、戊糖、碱基） DNA的结构（一级、高级；双螺旋结构特点） RNA的一般结构，与DNA结构的异同 三类RNA的结构特点及功能（rRNA、tRNA、mRNA） 核酸的理化性质 （紫外吸收、变性、杂交） * 本章主要概念 核酸 （nucleic acid） 核苷酸 （nucleotide） 核苷（nucleoside） 碱基(base), 嘌呤(purine), 嘧啶(pyrimidine) DNA双螺旋（DNA double helix） DNA变性（DNA denaturation） 融解温度（melting temperature ，Tm） 核酸杂交（nucleic acid hybridization） * * S型双球菌:外包有荚膜，不能被白血球吞噬，具有强烈毒性；R型双球菌:外无荚膜，容易被白血球吞噬，没有毒性。 * 杂环化合物（heterocyclic compound）：具有环状结构的一类化合物。构成环的原子除碳原子外，还至少含有一个杂原子。杂原子包括氧、硫、氮等。 * hm5C：羟甲基胞嘧啶 * * 划时代的发现——DNA双螺旋结构 1940年间，很多科学家被吸引到X-线衍射分析分子结构研究领域。1950年，刚刚获得PhD学位的青年天才James Watson(1928-)到丹麦做博士后；在一次学术会（1951）上，他遇到了Maurice Wilkins（1916-2004），第一次看到了DNA的X线衍射图。于是博士期间就对噬菌体DNA充满兴趣的Watson离开丹麦转到英国Cavendish实验室，决心揭示DNA的结构。在那里，他遇到了Francis Crick(1916-2004)； 后者正在利用X线衍技术研究蛋白质的结构。两人开始密切合作，根据实验提出DNA双螺旋结构模型。1952年，Wilkins的同事Rosalind