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- 2019-10-10 发布于湖北
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?如何让大肠杆菌生产人胰岛素? DNA聚合酶 DNA连接酶 3、基因的运载工具——运载体: 种类:常用的运载体主要有两类: 1)质粒 2)噬菌体或某些动植物病毒 基因工程最常用的运载体是_______ 质粒 1、质粒存在于细菌、酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够进行自主复制的很小的环状DNA分子。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。其中常含有抗药基因,如四环素的标记基因和抗青霉素基因。 2、质粒的存在对宿主细胞无影响,但复制只能在宿主细胞内完成。 质粒适于做运载体的原因: 标记基因,便于进行检测。 (1)能在宿主细胞中复制并稳定保存 (2)具有多个限制酶的切点,便于与外源基因连接。 (3)具有某些标记基因,便于筛选 运载体的特点(具备条件) 作用: 作为运载体,将目的基因送入受体细胞,用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 原理: 利用运载体侵染宿主细胞的能力,将目的基因导入宿主细胞。 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达 (四)基因工程的步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的特定基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、种子贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 步骤一:提取目的基因 方法: 1、直接分离:鸟枪法 2
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