第二章蛋白质定性定量分析.pptVIP

* 第二章 蛋白质的定性定量分析 蛋白质定性分析 (qualitative analysis) 确定样品中是否有蛋白质存在，以及存在的是何种蛋白质 蛋白质定量分析 (quantitative analysis) 确定样品中总蛋白含量，或者某种单一蛋白成分的含量 蛋白质含量的测定方法（重点掌握） 蛋白质相对分子量测定 (SDS) 等电聚焦电泳 (IEF)（一般了解） 蛋白质的免疫印迹分析 (western blotting) 第一章 蛋白质的含量测定 蛋白质的含量测定 基于蛋白质的 元素组成特点 基于蛋白质的 化学显色反应 基于蛋白质的 光吸收特性 蛋白质元素组成的特点 各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％ 由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此 只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据 以下公式推算出蛋白质的大致含量： 100克样品中蛋白质的含量 ( g % ) = 每克样品含氮克数× 6.25×100 1/16% 一、紫外光谱 (A280)吸收法 这一方法可用来快速检测溶液中是否含有 蛋白质成分。通常用于柱层析过程中检测蛋 白质的洗脱峰 原 理 色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280 nm附近 大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所以测定蛋白质溶液280 nm的光吸收值是分析溶液中