原核生物转录调控cla.ppt

Gene expression controls 基因表达: 从DNA到蛋白质的过程。 基因表达调控: 对基因表达过程的调节。 操纵子对转录的调节 Lac操纵子 Trp操纵子 ?因子对转录的调节 典型的操纵子包括： 1.结构基因：编码那些在某一特定的生物合成途径中起作用的，其表达被协同调控的酶。 2.调控元件：如操纵序列，是调节结构基因转录的一段DNA序列。 1. The operon 2. The lactose operon（乳糖操纵子） 3. The lac repressor（乳糖抑制蛋白） 4. Induction （诱导） 5. cAMP receptor protein （CRP） L1-2 乳糖操纵子 大肠杆菌能利用乳糖作为碳源，而利用乳糖作为碳源的酶只有当乳糖成为唯一的碳源时才会被合成。 Lactose operon: a regulatory gene and 3 stuctural genes, and 2 control elements lacZ codes for β-galactosidase (β-半 乳糖苷酶) for lactose hydrolysis(水解） lacY encodes a galactoside permease (半乳糖苷透性酶)to transport Lactose across the cell wall lacA encodes a thiogalactoside transacetylase (硫代半乳糖苷乙酰 转移酶)-抑制β-半乳糖苷酶有害产物积累 L1-3 乳糖阻抑物 由LacI基因编码 同亚基四聚体活性形式 Olac具有回文结构（28bp碱基） 乳糖缺乏时，阻抑物占据Olac Thus, RNA polymerase binds very tightly to Plac but no transcription occur because of the bound repressor L1-4 诱导 L1-5 cAMP受体蛋白 (CRP) CRP是一种激活蛋白(CAP) CRP－cAMP复合物才能结合DNA cAMP由葡萄糖控制 Plac启动子：弱启动子 没有强－35序列 弱的－10序列 Summary 阻抑物调控：-负调控 -缺乏乳糖；乳糖存在 cAMP受体蛋白的调控：-正调控 -缺少葡萄糖；有葡萄糖 乳糖是唯一碳源 葡萄糖是唯一碳源 乳糖和葡萄糖同时存在 L2 The Trp Operon 1. The trp operon（操纵子） 2. the trp repressor(阻抑物） 3. the attenuator（弱化子） 4. Leader RNA structure 5. The leader peptide（肽） 6. Attenuation（弱化作用） 7. Importance of attenuation L2-1 The Trp Operon 1. trp 操纵子 ：包括色氨酸合成途径中相关的5个结构基因,一个启动子，一个操纵序列一段前导序列，一个调节基因。 2. 该操纵子编码一个转录单元，从Otrp向下游转录7kb的转录物. 3. 作用：当细胞缺乏色氨酸时， trp 操纵子 可使色氨酸协同表达。 4.色氨酸操纵子RNA产物不稳定. L2-2 The Trp repressor （色氨酸阻抑物） 1. 色氨酸阻抑物：由独立的操纵子trpR编码，能与Otrp位点特异性结合。 2. 色氨酸阻抑物＋色氨酸——才能结合到操纵基因Otrp。 3. 阻抑物：二聚体（两个亚基） 一个中心区域 两个灵活的DNA解读头部 L2-3 The attenuator （弱化子/衰减子） Repressor does not account for all the regulation: Deletion of a sequence between the operator and trpE gene coding region (attenuator) increase both the basal and the activated levels of transcription. L2-3