酶动力学和酶反应器.pptVIP

一、游离酶反应器 1．搅拌罐式反应器(stirred tank reactor，STR) ：其基本结构由容器、搅拌器及保温装置组成。有时也可在容器壁上装上挡板，以促进反应物的混合。其结构如下： 超滤膜(UF)的孔径尺寸为l～lOOnm，可截留的相对分子质量范围为500～10000，它对游离酶和固定化酶(相对分子质量10000～100000)都有较高的截流能力。 常用的超滤膜酶反应器的结构如图所示 ： 3．喷射式反应器 喷射式反应器是利用高压蒸汽的喷射作用，实现酶与底物的混合，是进行高温短时催化反应的一种反应器。如图所示： 4．鼓泡式反应器 鼓泡式反应器(bubble column reactor，BCR)是利用从反应器底部通入的气体产生的大量气泡，在上升过程中起到提供反应底物和混合两种作用的一类反应器，它也是一种无搅拌装置的反应器。如图所示： 分批搅拌罐式反应器(batch stirred tank reactor，BSTR)和连续流搅拌罐式反应器(continuous flow stirred tank reactor，CSTR)。如图所示： 4．膜型反应器 由膜状或板状固定化酶组装的反应器 (membrane reactor，MR)。 根据膜组件型式的不同，分为平板式、螺旋卷式、转盘式、空心管式和中空纤维式酶膜反应器五种。 5．鼓泡式反应器 使用鼓泡式反应器进行固定化酶的催化反应时，反应系统中存在固、液、气三相，又称三相流化床式反应器。高径比大的反应器称为塔，也称鼓泡塔反应器。 酶反应器的发展 一、含有辅助因子再生的酶反应器 许多酶反应需辅因子（如辅酶、辅基、能量供给体等）的协助，辅因子的价格较贵，采用简单的添加方法，经济上不合算。因此，发展了含有辅因子再生的酶反应器，辅因子能反复使用，降低生产成本。 ①利用固定化脱氢酶，将固定化NADH再生为固定化NAD。依靠半透膜，将固定化NAD保留在反应器内。在反应过程中，固定化NAD不断变成固定化NADH，又不断再生为固定化NAD，满足反应所需。 ②麻省理工学院设计的ATP再生酶反应器等。 二、两相/多相反应器 许多底物不溶或微溶于水，如脂肪、类脂肪或极性较低的物质，进行酶转化时，水相中有浓度低、反应体积大、分离困难、能耗大。 酶反应在水-有机相中进行，可大大增加反应时的底物浓度。在两相或多相体系中反应，还可减少底物、特别是产物对酶的抑制作用，使酶反应进行到底及酶的操作稳定性延长。 两相反应：将酶或固定化酶置于水相中，而底物溶于有机相中，在搅拌或乳化条件下反应。有机相一般使用碳氧化合物及芳香族化合物，让有机相对酶活的影响减少到最小。 3、酶的稳定性 固定化酶催化活性损失可能原因： 酶的失效 酶从载体上脱落 载体的损坏。 5.3.3 酶反应器的操作 注意事项： 控制酶反应器中流动状态 维持酶反应器的恒定生产能力 保持酶反应器的稳定性 防止酶反应器的污染 酶反应器的微生物污染 不必在完全无菌条件下操作 注意卫生条件符合标准 Vm,Km都变小 三种可逆模式小结 类型 Vmax Km 无抑制剂 Vmax Km 竟争性 不变 增大 非竟争 变小 不变 反竟争 变小 变小 (二) 底物抑制 底物抑制的可能机理 由于底物浓度过高时，2个或2个以上的底物分子分别占据了部分的活性位点，形成死端复合物。 过量的底物分子类似于反竞争性抑制。 例: …O2C | CH2 | CH2 | …O2C 琥珀酸脱氢酶 -O2C | CH || CH | -O2C 当底物浓度过高时 …O2C—CH2—CH2—CO2… …O2C—CH2—CH2—CO2… (三） 产物抑制 例:葡萄糖-6-磷酸对己糖激酶，ATP对丙酮酸激酶的抑制皆属此类。 在酶反应中，产物在释出之前可以和酶以复合物(EP)的形式存在。 产物可