第五章血细胞分析仪及其临床应用.pptVIP

1. 自动化程度越来越高 2. 提供参数越来越多 3. 精密度越来越高 4. 速度越来越快 5. 越来越注重环保 6. 质控功能得到加强 7. 智能化程度越来越高 一、血细胞分析仪的原理 （一）细胞计数及体积测定原理 1. 电阻抗检测原理血细胞是相对不良导体，当血细胞通过小孔电阻增加，出现一个脉冲信号。脉冲大小和振幅高低反应细胞大小，又叫库尔特（Coulter）原理 脉冲信号传递步骤： ①放大②阈值调节③甄别④整形⑤计数 细胞直方图： “Y”轴：相对数 “X”轴：体积以飞升（fl）为单位。 2. 流式细胞术加光学检测原理 如图 （二）白细胞分类原理 1. 电阻抗法 标本 单个白细胞 按体积大小分类 三群 第一群为小细胞区，35～90fl，淋巴细胞； 第二群为中间细胞区，90～160fl，包括幼稚细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞； 第三群为大细胞区，160fl以上，中性粒细胞 2. 容量、电导、光散射（VCS）白细胞分类法 V :体积 电阻抗原理测定 C:电导性 高频电磁探针测定内部结构 S：光散射 激光扫描测定颗粒构型和质量 3. 阻抗与射频技术联合白细胞分类法 （1）嗜酸性粒细胞检测系统 经特殊溶血剂 嗜酸性粒细胞通过小孔产生脉冲被计数。 （2）嗜碱性粒细胞检测系统 原理同嗜酸性粒细胞 （3）淋巴、单核、粒细胞（中性、嗜碱性、嗜酸性）检测系统 采用电阻抗与射频联合检测检测细胞大小（DC）和核及颗粒的密度（RF） （4）幼稚细胞检测系统 幼稚细胞形态不受破坏，可通过电阻抗法检测 4. 光散射与细胞化学技术联合白细胞分类计数 联合利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行血细胞分类计数 5. 多角度偏振光散射白细胞分类技术 自然态白细胞 多角度光散射分类 （三）红细胞测试原理 1. 红细胞（RBC）和血细胞比容（HCT） 电阻抗法形成脉冲 脉冲的多少：红细胞数目 脉冲高度：单个红细胞体积 脉冲高度叠加：血细胞的比容 2. 血红蛋白测定（Hb） 血液 释放Hb 540nm比色 3. 各项红细胞指数检测原理 MCV、MCH、MCHC、RDW根据RBC、HCT和Hb换算 （四）血小板分析原理 与红细胞一起在一个系统进行检测，2～30fl 内检测 （五）全自动血细胞计数仪配置网织红细胞检测原理 网织红细胞胞质中尚残留RNA，可与特殊染料结合，应用流式细胞仪 （FCM）测量时发出特定颜色荧光，进行RNA定量检测网织红 二、血细胞分析仪的类型 （一）半自动二分群血细胞分析仪 （二）全自动三分群血细胞分析仪 （三）全自动五分类血细胞分析仪 （四）全自动五分类连接网织红细胞分析仪 （二）红细胞体积分布宽度 RDW 概念外周血红细胞体积大小异质性，用变异系数来表示（CV） 参考值 11.6%～14.0% 临床意义： （1）缺铁性贫血（IDA）早期诊断和疗效观察 95%以上的IDA和RDW均异常 （2）鉴别IDA和轻型β-地中海贫血 均为小细胞低色素贫血，前者RDW增高；后者RDW基本正常。 （3）MCV/RDW贫血分类法有助于贫血的形态学分类 4）用于贫血病因学鉴别诊断：肾性贫血RDW正常；肝性贫血RDW增高 根据MCV、RDW进行贫血形态学分类 （三）血小板参数 1. 血小板平均体积（MPV） 血液中血小板的平均体积，用飞升（fl）表示。 参考值 6.8～13.6fl 临床意义　结合血小板数的变化。 （1）MPV增大：①PLT破坏增多，骨髓代偿生成增加时，使MPV增大。②作为骨髓造血功能恢复的较早指标，MPV常先于血小板升高。③其他 （2）MPV减少：①骨髓造血功能损伤MPV随PLT同时持续下降②严重感染伴有败血症等MPV减少。 （四）血细胞体积直方图的应用 正常情况下： 红细胞直方图：呈正态分布 血小板直方图：呈非正态分布 白细胞直方图：根据细胞形态大小及仪器型号不 同呈现不同的曲线，一般是2～3个峰态曲线 五、血细胞分析仪质量控制 （一）分析前质量控制 1. 操作技术人员要求 2. 仪器安装条件 温度应在15～25℃，相对湿度应＜80% 3. 仪器的验收 4. 仪器的校准变异应＜3%，携带污染率＜2%，重复性＜3%，线性范围较宽 5. 标本的采集和运送 EDTA-K2抗凝血6h内测定 6. 校准物和质控物 （二）分析中质量控制 1. 每天开