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第二章 遗传信息的传递 第一节 中心法则 复制叉 (replication fork) 复制时双链打开，分开成两股，新链沿 着张开的模板生成，复制中形成的这种Y 字形的结构称为复制叉或生长点。 DNA复制起始点和复制叉 DNA复制的体系： 1.底物：dNTP (dATP、dGTP 、 dCTP 、dTTP) ； 2.模板(template)：解开成单链的DNA母链； 3.引物(primer)：提供3′-OH末端的寡核苷酸； 4.聚合酶(polymerase)：依赖DNA的DNA聚合酶， 简写为DNA-pol； 5.其它的酶和蛋白质因子 DNA聚合酶 催化dNTP聚合到核酸链上的酶。是DNA复制的主要酶。 全称叫依赖DNA的DNA聚合酶（DNA dependent DNA polymerase）或DNA指 导的DNA聚合酶（DNA-directed DNA polymerase），均缩写为DDDP。 DNA聚合酶催化的反应 1. 5′至3′的聚合活性 催化四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）一个一个地接到DNA链末端3′-羟基上，形成3′，5′-磷酸二酯键，同时脱氧核苷三磷酸脱下焦磷酸。焦磷酸水解放出能量，促进DNA复制反应的进行。 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 聚合反应机理： 聚合反应的特点： (1) 以单链DNA为模板 (2) 以dNTP为原料 (3) 引物提供3′-OH (4) 聚合方向为5′→3′ 2.核酸外切酶活性 DNA聚合酶的种类 1. 原核生物的DNA聚合酶 DNA-pol I: 单一肽链的大分子 含量最多 可被水解成两个片段 小片段(N端)：具有5′→3′外切酶活性； 大片段(C端)：具有聚合活性和3′→5′ 外切酶活性，也称为Klenow片段，是常用的工具酶。 DNA-pol III: 由10种亚基组成的不对称聚合体 催化效率最高 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ中的亚基 亚基 全酶中的亚基数 分子量 α 2 13200 ε 2 27000 θ　　　　 2 10000 τ　　　　　 2 71000 γ　　　　　 2 52000 δ　　　　　 1 35000 δ’ 1 33000 χ 1 15000 ψ 1 12000 β 4 37000 2. 真核生物的DNA聚合酶 DNA-pol ? 复制中合成引物及其后4-5个寡 聚脱氧核糖核苷酸的合成 DNA-pol ? 没有其他pol时才起作用 DNA-pol ? 催化线粒体DNA的复制 DNA-pol ? 复制中延长前导链（依赖PCNA） DNA-pol ? 校对、修复和填补缺口 解旋解链酶类 　　解开并理顺DNA双链，维持DNA 处于单链状态。主要有解螺旋酶、 DNA拓扑异构酶和单链DNA结合蛋白。 解螺旋酶 (helicase) : 　模板对复制的指导作用在于碱基的准确 配对，而碱基却埋在双螺旋的内部。只有把DNA解开成单链，它才能起模板作用。 解螺旋酶是最早发现的与复制有关的蛋 白质，当时称为rep蛋白。作用是利用ATP供 能，解开DNA双链。 单链DNA结合蛋白 (SSB)