血清谷丙转氨酶测定设计实验-公开课件（讲义）.pptVIP

血清谷丙转氨酶活性的测定 ;实验目的;血清谷丙转氨酶作用于由丙氨酸及a一酮戊二酸组成的基质。产生丙酮酸及谷氨酸 血清加基液保温后产生丙酮酸的多少，即反应出谷丙转氨酶活性的大小。 丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在酸性溶液中显黄色，在碱性溶液中成醌型显棕红色。 ;本实验是在碱性条件下，生成醌类化合物的量反应丙酮酸的量，即反应了谷丙转氨酶的活性。 本法以lml血清与基质液在37℃，保温30分钟生成2.5μg丙酮酸为谷丙转氨酶活性1单位 求酶活性单位的方法： 1、标准品对照法：检品与标准丙酮酸液同样处理呈色，进行比色，计算出酶活性单位。 2、标准曲线法：取含待测物的一系列标准溶液，作标准曲线，由标准曲线查得活性单位。;一、标准品对照法 取试管4支，标号，按下表加试剂：;56℃放置5分钟。;计 算;二、标准曲线法 配制一系列不同浓度的标准丙酮酸液，并且各加以适量的基质液， 作成标准曲线。具体做法如下表。;各管混匀，放37℃水浴5分钟;;注意事项;分析实验误差产生的原因 血清GPT活性测定的意义