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乳酸发酵短杆菌中的赖氨酸代谢 乳酸发酵短杆菌中的赖氨酸代谢控制发酵 无锡轻工业大学 (214036) 潘中明 徐 昀 应向贤 张星元 摘 要 以本室选育的赖氨酸产生菌 AL 039 为出发菌株 ,以亚硝基胍诱变 ,筛选到一株氟丙酮酸敏感型突变 株FP 094 ,其赖氨酸产量比出发菌株提高 37. 5 % 。进而研究了生物素 、醋酸钙对该菌产赖氨酸的影响 。 关键词 赖氨酸 ;乳酸发酵短杆菌 ;氟丙酮酸 中图分类号 TQ 920. 1 ; S 816. 7 The Meta bolism Controlled Fermentation of Lysine in B revibacteri um L actof erment um ABSTRACT A L - lysine producer FP 094 was obtained from an original strain AL 039 by mutation of NTG treatment . Compared with AL 039 , the L - lysine productive capacity in FP 094 has been increased by 37. 5 %. The effect caused by biotin and/ or Ca (Ac) 2 has been researched KEYWO RDS lysine ; brevibacterium lactofermentum ;fluoropyruvate 1 前言 L - 赖氨酸是碱性氨基酸 ,分子量 146. 19 ,从水中结晶呈 白色或无 色 针 状 。加 热 到 210 ℃色 泽 加 深 , 224. 5 ℃分 解 。 由于游离的 L - 赖氨酸极易潮解 ,易发黄变质并有刺激性腥 味 ,难于长期保存 ,因此 ,一般商品都是以 L - 赖氨酸盐酸盐 的形式存在 。 目前 ,赖氨酸的消费结构中 ,用于饲料添加剂的约占总 量的 90 %左右 。 赖氨酸产品有食品级 、医药级和饲料级三种规格 ,一般 以饲料级产品规格生产的赖氨酸经过进一步精制提纯 ,可以 得到食品级和医药级的赖氨酸产品 。赖氨酸目前主要用作 食品添加剂 、饲料添加剂和医药中间体 。 畜禽缺乏赖氨酸时 ,幼禽幼畜生长缓慢 ,氮平衡失调 ,皮 下脂肪减少 ,骨钙化失常 。在饲料工业中 ,赖氨酸作为配合 饲料的添加剂 ,可调节饲料中氨基酸的比例 ,从而提高饲料 的营养价值 ,提高饲料质量 。用以饲喂畜禽 ,不仅降低饲肉 比率 ,提高饲料的利用率 ,降低成本 ,而且还能促进畜禽生长 发育 ,缩短饲养期 , 提高瘦肉率 和 产 卵 率 、增 强 畜 禽 的 免 疫 力 。赖氨酸在饲料中的添加量一般为 0. 1 %～0. 3 % 。 赖氨酸和其它氨基酸一样是细胞合成蛋白质的材料 ,是 中间代谢产物 。在正常的细胞中 ,由于细胞所具有的自我调 节作用 ,不能过量积累赖氨酸 。要使细胞在发酵中过量积累 赖氨酸 ,最有效的方法是根据菌种的代谢特性 ,人为地改变 菌种的代谢及代谢调节特性 ,使代谢流按照我们所需要的方 向流动 。 (1) 完全培养基 ( CM) 牛肉膏 0. 3 % ,蛋白胨 1 % ,NaCl 0. 5 %。 固体培养基另加 2 %的琼脂 p H 7. 2～7. 4 ,0. 1 MPa压力 下灭菌30 min (2) 基本培养基 (MM) 葡 萄 糖 2 % , ( NH4 ) 2 SO4 1 % , 尿 素 0. 25 % , K2 HPO4 0. 1 % , MgSO4 ·7H2O 0. 04 % , FeSO4 ·7H2O 1 mg/ 100 ml , MnSO4 ·H2O 2 mg/ 100 ml , 生 物 素 5 μg/ 100 ml , VB1 10μg/ 100 ml (分消) ,琼脂 1. 5 % 。 p H7. 0 ,0. 1 MPa 压力下灭菌15 min 。 (3) 发酵培养基 葡 萄 糖 14 % , ( NH4 ) 2 SO4 4 % , MgSO4 ·7H2O 0. 04 % , K2 HPO4 0. 1 % , FeSO4 ·7H2O 1 mg/ 100 ml , MnSO4 ·H2O 0. 8 mg/ 100 ml ,生物素 5 μg/ 100 ml ,VB1 20μg/ 100 ml ,豆饼水 解液 5 % ,CaCO3 2 % 。 在 p H 7. 0 和0. 07 MPa压力下灭菌7 min 。 213 培养条件 (1) 斜面菌种 : 30 ℃下