红霉素链霉菌发酵液中提取红霉素.pptxVIP

红霉素链霉菌发酵液中提取红霉素;目录;目录;;红霉素结构;红霉素A是白色或类白色的结晶性粉末，微有吸湿性，味苦，易溶于醇类、丙酮、氯仿、酯类（如乙酯、丁酯、戊酯等），微溶于乙醚。在水中的溶解度为2mg/ml（25℃左右），它随着温度的升高而减少。在室温和pH 6～8的条件下，其溶液相当稳定，温度升高稳定性下降。红霉素熔点为135～140℃（游离碱水合物），190～193℃（无水游离碱）。且具有旋光性和紫外吸收峰。红霉素碱能和有机酸或无机酸类结合成盐，其盐类易溶于水。在临床上具有广泛用途的是红霉素A，它的抑菌活性最高。 ;2、红霉素的作用及应用范围：;1.2、红霉素的生物合成; 产生菌培养;目录;2.1、一般流程 2.2、发酵工艺要点 2.3、发酵液的成分和提取难度分析 ;2.1红霉素生产的一般流程;2.2、发酵工艺要点;1、种子;2、培养基;（1）氮源;（2）碳源;3、培养条件的控制;（1）通气搅拌;（4）中间补料;（6）发酵液浓度的控制;目录;;提纯的特点： 1、目标产物低； 2、杂质多，黏度大； 3、红霉素是多组分抗生素； 4、性质不稳定； 5、（药品）符合特殊的质量和安全要求； ;传统的提取工艺： 1、溶媒萃取法。碱性条件下，红霉素可以由水相转移到有机相——萃取；酸性条件下，红霉素由有机相转移到水相——反萃取；反复的相转移中实现浓缩和除杂。 当pH＞10.0时红霉素基本以游离碱的形式存在，能溶于乙酸丁酯中，当pH＜6.0时，红霉素以盐的形式存在，其在水中的溶解度随pH降低而迅速增大。 提取采用在乙酸丁酯及在醋酸缓冲液中反复萃取。 ;发酵液;2、中间盐沉淀法： 红霉素分子结构中有一个二甲基氨基官能团，是一个弱碱，pKa=8.6，在酸性条件下与某些酸会形成盐，如红霉素乳酸盐。 在一次或二次有机溶剂萃取液中或者在一次或二次反萃液中使红霉素转成盐的形式沉沉下来，包括草酸盐、乳酸盐和硫氰酸盐，以硫氰酸盐和乳酸盐最为广泛。;发酵液;传统工艺存在的问题： 1、ZnSO4作为絮凝剂 (1）滤饼中含有大量Zn2+，滤饼无法实现在利用， 污染土壤 ； (2）滤液萃取后的废水中存在大量SO42+，废水处理时产生有毒气体H2S，污染大气； 2、板框过滤 (1）过滤质量差，导致了乳化现象，降低了萃取收率，增加了溶媒用量，影响了产品的品质； (2）过滤过程加入助滤剂影响产品的纯度和收率； (3）需要人为添加滤布、清洗滤布，无法自动化，生产效率低； (4）产生废水量大，增加废水处理成本； ;3、DRY500碟片式离心机（国内对红霉素分离时多采用）。自动化程度低，需要人为拆卸、清洗，费时费力，影响生产进度；人为监测pH值，不能及时监控生产实况。 4、乳化现象。降低了萃取收率。 5、破乳剂。用量大，价格昂贵，对人体有害，污染环境。 6、萃取剂。消耗大，成本高，回收耗能大，废液处理处理困难。 7、其他 (1）萃取时pH一般在10，反萃取时pH一般在5，容易引起红霉素的降解，尤其易发生酸性降解； (2）发酵液碱化过程中，局部的过酸过碱降解红霉素； (3）板框过滤各板框间差异性大，过滤工艺稳定性差，导致产品质量和收率波动较大。 ;改进工艺： 1、萃取法改进的工艺 (1）固定床溶剂萃取法：将萃取剂（醋酸丁酯）浸渍在多孔介质（浮石颗粒）运用固定床技术萃取。 ——避免乳化，减少产品损失，提高萃取收率及产品品质，不使用离心机 ——处理效率低，废料难以处理 （2）以乙酸仲丁酯为萃取剂 ——红霉素的萃取收率提高 ——高度易燃，长期接触对眼、粘膜、皮肤 有害；没有解决多数问题 ; (3）薄膜浓缩：薄膜浓缩板框过滤后滤液 ——减少溶媒耗量，但收率低 (4）双水相萃取：往发酵液中加入EOPO及K2HPO4晶体，搅拌静置离心分相后萃取。 ——分相迅速，浓缩倍数高，节省溶媒 ——EOPO使用时有大量泡沫产生；生产成本高 (5）相转变萃取：添加一种溶于水而不溶于萃取剂的惰性物质，降低萃取剂在发酵液中的溶解度。 ——收率提高 ——萃取剂乙腈易挥发易燃有毒；NaCl用量大，废水难处理 ;2、盐析法：向发酵液中加入足够量的氯化钠或硫酸钠或其他盐类，降低红霉素的溶解度，提高红霉素在萃取剂中的分配系数。 ——减少溶媒，红霉素得率增加