血液分析仪及其临床应用教程教案.pptVIP

血液分析仪及其临床应用 ;血液分析仪（hematology analyzer, HA）：临床血液一般检查最常用仪器。 ? 50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明电子血细胞计数仪并申请专利。 ;血液分析仪优势： 检测项目多 速度快 精度高 易操作 ;一、检测原理 检测功能： 细胞计数功能 细胞分类功能 ? 检测原理分为2类： （一）电阻抗法 1.电阻抗原理(principle of electrical impedance)，又称库尔特原理（Coulter principle） ;;2.计数部件结构组成 等渗电解质溶液 细胞悬液 小孔管（传感器transducer）宝石孔（直径 100μm，厚度约75μm） 脉冲数量和大小反映细胞： 数量 体积大小 ;3.白细胞计数和分类计数原理 仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。 每个通道：1.64fl 根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图（Histogram）。 ? ;经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了变化！！！ 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小）：一般在35～90fl。 第二群（90～160fl）是单个核细胞区，（中间细胞）： 单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大）：一般在135-350fl ;三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图（直方图） 35 90 160 300 400 450(fl) ;仪器组成： ①信号发生器 ② 放大器 ③阈值调节 ④甄别器 ⑤整形器 ⑥计数系统 ;2.电阻抗法红细胞检测原理 （1）红细胞计数和血细胞比容测定 与白细胞计数相似。(%);(2)血红蛋白测定：血红蛋白与溶血剂中的特定试剂结合形成一种血红蛋白衍生物，在530～550nm下进行比色。 ICSH推荐用氰化高铁法（540nm比色）。 非氰化溶血剂，如SDS-Hb。 (3)红细胞其他参数检测 ;3.电阻抗法血小板检测原理 血小板计数（platelet, PLT）： 随红细胞在一个系统中进行检测。 直方图在2～28fl（不同仪器不一）。 血小板平均体积（mean platelet volume, MPV）。 ;（二）光散射法血液分析仪检测原理 组合应用 电学 光学 细胞化学等 ;细胞流电学和光学检测图（AcT 5diff）;光散射法白细胞检测原理类别 （1）激光与细胞化学法 1）过氧化物酶检测通道： 嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞过氧化物酶活性比单核细胞强 淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。 散射图定位：X轴为吸光率（酶反应??度）、Y轴为光散射（细胞大小）显示检测结果。 2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。 ;（2）容量、电导、光散射（volume，conductivity， scatter, VCS）法： 血细胞未经任何处理，保持与体内完全相同状态下进行。 ? VCS法检测原理 细胞体积技术（测量细胞大小） 电导性技术（测量细胞内部结构） 光散射（scatter, S）技术（测量细胞形态、细胞核和细胞颗粒）。 ;;VCS可显示3种细胞散点图 DF1（体积值和散射光值） DF2（体积值和电导值） DF3（体积值和电导值）：只显示basophil ;细胞流电学和光学散点图（AcT 5diff） ;VCS血液分析仪正常白细胞散点图实例 ;（3）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）： ①嗜酸性粒细胞检测系统 ②嗜碱性粒细胞检测系统 ③ 5种白细胞分类检测系统：直流电（direct current，DC）为横坐标，以射频（radio frequency ，RF）为纵坐标。 ④幼稚细胞检测系统： 幼稚细胞膜脂质较成熟细胞少。 加入硫化氨基酸，与幼稚细胞的结合量多于较成熟的细胞 幼稚细胞对溶血剂有抵抗作用，从而提供幼稚髓细胞信息（immature myeloid information，IMI）。 ? ;（4）多角度偏振光散射（multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法 ①0°：前角光散射（1°～3°），可粗略测定细胞大小。 ②10°：狭角光散射（7°～11°），可测定细胞内部结构相对特征。 ③90°：垂直光散射（70°～110°），测定细胞核分叶情况。 ④90°：消偏振光散射（70°～110°），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。 ;2.光散射法红细胞检测原理 低角度(2°～3°