实验质粒DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳课件.pptVIP

实验质粒DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳;;;一、实验目的 ;质粒按复制方式分为两种类型： 松弛型质粒 20～200个拷贝 /细胞 严紧型质粒 1～2个拷贝 /细胞;由pUC18载体改建而成，在pUC18载体的MCS处的Xba?I和Sal?I识别位点之间插入了EcoR?V识别位点，用EcoR?V进行酶切反应后，再在两侧的3＇端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有PCR?产物的3＇末端添加一个“A”的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。;; ;三、仪器、材料与试剂 ;Solution I 50mmol／L 葡萄糖 25mmol／L Tris·HCl(pH8.0) 10 mmol／L EDTA ;Solution II 0.4mol/LNaOH，2％SDS, 用前等体积混合;;;四、实验步骤;一、实验目的;;;三、仪器、材料与试剂; (二)试剂 ;;;五、实验结果;五.问题与讨论：