刘忠华,钟翎2,黄韧,程树军.PDFVIP

维普资讯 第 l8卷 4期 中 国 病 毒 学 l8 (4)：401—-403 2003年 8月 VIR0L0GICA SINIGA August 2003 半嵌套式 PCR技术 区别检测犬细小病毒疫苗株和强毒株的研究 刘忠华 ，钟 翎2，黄 韧 ，程树军 (1．广东省实验动物监测所，广东广州，510260：2．中山大学生命科学院，广东广州，510275) EstablishmentofPolymeraseChainReactionforDiscrim inationofVaccine StrainsofCanineparvovirus LIUZhong．hua，ZHONGLing，HUANGRen，CHENGshu-jun rJ．GuangdongLaboratoryAnimalsMonitoringInstitute，Guangzhou510260，China；2．CollegeoflifeSciences, ZhongshanUniversity,Guangzhou510275。C 埘J Abstract：TwopairsofPCRprimersweredesignedaccordingtothesequancesofhtevaccinestrainand virulentsrtainofCPV．HeminestedPCR mehtodwasestablished．ResultofhtefirstPCR amplification showde htesamema plifide productsof574bplenght ，afterhtesecondPCR ma plification，hteviur lent srtainproducedhtelenght 364bpfragment，buthtevaccinesrtaincouldn’tproducehtat．Theproductsof PCR wereexaminedbyelecrtophoresisna drestrictionenzymedigestion．Th eresultshowedhtelenght ofhtefragmentna denzymesiteswere ashtesameashtosedesigned．Th ePCR assayofCPV was provedtobespce ificnadsensitive．Itshowshtathtismehtodmaybeusde indiscriminatinghtevaccine srtainnad viur lentsrtain ofCPV ormonitoringhtevaccinatedcna ineinordertoavioddiseasena d finna ciallosing． Keywords：Parvoviridae；Hemi nestedPCR；Vaccinesrtain 关键词：犬细小病毒；半嵌套式PCR；弱毒疫苗株 中图分类号：Q93．332 文献标识码 ：A 文章编号：1003—5125(2003)04．4001—03 犬 细 小病 毒 病 是 由犬 细 小病 毒 (Canine 感动物，观察易感动物的临床症状、组织学变化来 parvovirus，CPV)引起的一种多发于幼犬的致死性 鉴定对易感动物的致病性，据此来鉴定强、弱毒株。 传染病 ，主要表现为出血性肠炎和心肌炎…。在 自 此方法影响因素较多，准确性低。本研究根据文献 然条件下本病多呈散发，而在养犬比较集中的地方 报道的犬细小病毒弱毒疫苗株 (CPV．bl14)的序 则常群发[2】。目前，预防本病的方法主要依靠接种 列，同CPV强毒株