G试验GM试验讲义.pptVIP

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;对人类致病真菌;形态特性;一、侵袭性真菌病诊断治疗现状 二、G实验原理以及临床应用 三、侵袭性曲霉菌病感染现状 四、侵袭性曲霉菌病的临床诊断治疗现状 五、GM试验原理以及临床应用 六、 G试验GM试验联合检测优势 ;LOGO;侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)即以往所说的深部真菌病,是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。 据WHO统计,能引起人类疾病的真菌约有 270 余种,尤其是深部真菌,可侵袭心、肺、血液、胃肠等人体各个器官和系统。真菌感染已成为临床感染学中不可忽略的一部分。 ;;少见真菌尸检检出率也有所上升;院内真菌感染的病原体以念珠菌居多,各临床科室发病率有所不同;;念珠菌属-美国院内血流感染第1位致死菌群;侵袭性真菌病(IFD)宿主因素;不同部位真菌感染流行病学存在差别;深部真菌感染防治策略;早期诊断和治疗可显著降低患者死亡率;传统诊断方法;LOGO;;检测样本:血清 试验方法:动态显色法 装量:96人份 数据计算方式:速率法 定量检测:通过标准曲线方程精确计算含量 检测范围:37.5-600pg/mL 检测时间:60min; 试验检测(1-3)-β-D-葡聚糖基于鲎试验的基本原理,即(1-3)-β-D-葡聚糖激活鲎变形细胞中的G因子亚基,产生丝氨酸蛋白酶,后者可将试剂中带有寡核苷酸的发色底物(Boc-Leu-Gly-PNA)中的发色基团对硝基苯胺(PNA)游离出来,并产生颜色,在405nm进行比色,待测样本溶液吸光度与溶液中(1-3)-β-D-葡聚糖浓度成正比。;G试验被列入真菌诊断和治疗的指南;G试验检测的特点 ; 应用纤维素膜进行血液透析患者 标本接触纱布或其他含有葡聚糖的材料 操作者处理标本存在污染 静脉输注白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白或血液制品 某些细菌败血病患者(尤其是链球菌败血症) 使用多糖类(香菇多糖、裂殖菌多糖)抗肿瘤类药物 食用蘑菇类食物 服用磺胺类药物、阿莫西林/克拉维酸、头孢类药物、多粘菌素、厄他培南也会引起不同程度的假阳性 ;检测隐球菌和接合菌(犁头霉、毛霉、根霉)感染 抗原-抗体免疫复合物形成 抗真菌药的使用,如卡泊芬净,能非竞争抑制BG合?? 标本放置时间过长(一般不超过6小时) ; G试验适用标本类型和采集、保存注意事项 1、标本是血清,对于细胞培养液应使用专用试剂盒。 2、细胞培养液标本必须离心,取上清液送检。 3、标本采集应避免溶血,黄疸和脂血标本会影响检测结果,干扰程度与黄疸及脂血程度而定。 4、标本最好在6小时内检测,如不能及时检测,应保存于2-8?C,不超过24小时,如长期保存应保存于-20?C,但避免反复冻融(在保存期间可能会使1,3-?-D-葡聚糖降解或由于标本基质效应变化影响检测结果)。 ;三、侵袭性曲霉菌病感染现状;曲 霉 菌( Aspergillus );侵袭性曲霉病(Invasive Aspergillosis, IA );1991年1月- 2009年10月报道曲霉病1457例,其中肺曲霉病1047例;曲霉菌感染的宿主因素-----免疫缺陷;;血液恶性肿瘤患者曲霉菌感染发生率在逐年升高;曲霉始终是血液科患者最主要的致病真菌;曲霉菌临床感染现状—死亡率;不同诊治情况下侵袭性曲霉 感染的死亡率;美国四大医疗中心做的关于IFI的一项回顾性研究;四、侵袭性曲霉菌病的临床诊断治疗现状;2008年IDSA曲霉病治疗指南指出 多种方法用于诊断曲霉感染;曲霉菌的实验室检测方法;快速报告结果 敏感性提高 取材简便 多以真菌在致病状态产生的物质为检测标志物,结果阳性提示有致病性 定量检测可判断感染严重程度及疗效评估;欧洲癌症治疗研究组织(EORTC) 美国国家过敏症与传染病研究所霉菌病研究组(MSG)批准用于真菌诊断 中国血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则( 第3次修订) ;GM试验的临床意义;早期诊断;曲霉菌:伏立康唑,伊曲康唑, 卡泊芬净,两性霉素-B等 念珠菌: 白色念珠菌: 氟康唑; 非白念: 伏立康唑或卡泊芬净; 卡氏肺囊虫: 复方新诺明、卡泊芬净 毛霉菌: 目前只有两性霉素-B ; GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度,动态监测血清GM水平的变化有助于判断抗真菌治疗的效果。 在治疗期间,如果病人GM持续阳性或保持较高水平则预后差。 GM抗原清除早的病人预后好,提示连续的血清GM检测能够监测病情变化。;五、GM试验原理以及临床应用;GM试验;GM试验; GM试

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