毒理学发育毒性与致畸作用.pptVIP

* * 1．药物 根据药物对人类的孕体造成危险的证据，FDA(1979)对于药物在妊娠期的使用采用字母A、B、C、D和X来进行等级评定，分类管理。ICH人类用药危险度分类研究设计中也有类似规定。要求医生按规定开处方，使妊娠妇女按规定使用这些药品 * * * * A类：在妊娠人群中控制良好的研究未能证实有危险 X类：在妊娠期用药是不当的。对胎儿的危险比患者任何可能的受益更重要 C类：不能排除危险。缺乏人的研究，而动物研究缺乏或是阳性，但药物对患者的好处可能证明潜在的危险是值得的 * * A、B、C类：仅在明显需要，或证明可能受益与对胎儿可能的危险比较是可取时，在怀孕期间可以使用 D类：在怀孕期间使用，应通知病人对胎儿可能的危害 X：怀孕或可能怀孕的妇女中禁止使用 * * 2．环境化学物 对于环境化学物，发育毒性的危险性评价程序的目的通常是要得出一个NOAEL，考虑安全的多变性或不确定因素，最终得出对人假定是相对安全的暴露水平 * * 1996年，美国食物质量防护行动(FQPA)考虑到来自不同来源的同一毒物通过共同的作用模式的联合接触，以及内分泌干扰作用的累积效应，在利用动物实验得到的NOAEL为孩子计算允许摄入量时，除了考虑其他的不肯定因素外，额外增加了10倍的安全系数 * * 3．确认人类致畸物的标准 某种特异的缺陷或几种缺陷综合征的发病率突然增加 缺陷的增加与某种已知的环境改变，如某种新药的广泛使用巧合 已知在妊娠的特殊阶段接触环境的改变，产生有特征性的缺陷综合征 缺少妊娠时引起特征性缺陷婴儿产生的其他普通因子 * * 1、大鼠全胚胎培养 (whole embryo culture, WEC) 从孕期第9，10天大鼠子宫取出胚胎，剥去Reichert膜，放入培养液中加入受试物，在含O2、CO2、N2环境中，旋转培养。观察胚胎发育情况，记录胚胎存活，检测胚芽、卵黄囊直径、体节和体长 （三）发育毒性的替代试验 * * 以胚胎的心跳和血液循环是否存在作为胚胎存活的指标；以卵黄囊直径、颅臀长和头长、体节数和胚胎重作为胚胎生长发育的指标；根据Brown评分对器官形态分化作出评价。筛试化学物的发育毒性、探讨其剂量反应关系和作用机制 * * 2、胚胎细胞微团培养 从第11天的大鼠胚胎取得代表CNS的原代中脑细胞微团、肢芽区或其他区的细胞微团，在培养瓶中分别加入不同浓度的受试物共同培养5天；用中性红染色判断细胞存活；用Alcian蓝染色判断肢芽软骨细胞分化数量；苏木素染色判断CNS细胞分化数量。对结果进行处理，求出影响终点的IC50。比较受试物组与对照组数据，评价化学毒物的细胞毒性和发育毒性 (micromass culture) * * 3、小鼠胚胎干细胞试验 将小鼠胚泡内细胞团衍生的胚胎干细胞(embryonic stem cells，ES细胞)在特定条件下，可定向分化为机体多种细胞，因此可作为生物测试系统，用于哺乳动物细胞分化、组织形成过程的发育毒性研究 (the mouse embryonic stem cell test，EST) * * 4、体内预筛式样 原理：大多数出生前受到的损害将在出生后表现为存活力(存活率)下降和(或)生长迟缓 观察出生3天内的新生仔外观畸形、胚胎致死、生长迟缓等发育毒性表现，对新生子代进行外部畸形、生长和生存能力的评估 * * 谢谢！ * * 化学毒物对孕母产生的损伤作用 增重减慢、功能异常、临床症状、死亡 常用增重减慢和死亡率来表示 三、母体毒性与发育毒性 （一）母体因素对发育毒性的影响 母体毒性(maternal toxicity) * * 1、遗传学 2、疾病 3、营养 4、应激 5、对胎盘的毒性 （一）母体因素对发育毒性的影响 * * 1．遗传学 孕母的遗传结构是孕体发育结果的一个决定因素 如唇腭裂[CI(P)]的发病率依赖于母体的而非胚胎的基因型，白人中的发病率比黑人中更高。在两个相关的小鼠品系AJ系和CL/Fr系中，自发CL(P)率分别为8%-10%和18%-26% * * 2．疾病 母体未控制的糖尿病，某些母体的感染，经过间接的疾病相关的母体变化或直接经胎盘的感染对孕体有不利的影响。如巨细胞病毒感染与胎儿死亡，小头畸形，心智发育延滞、盲目和耳聋有关联 过高热是实验动物的强致畸因子，在人类妊娠最初三个月内母体发热与中枢神经系统畸形有关 * * 3．营养 蛋白质、热量、维生素，微量元素及酶辅因子的缺乏已知对妊娠有不利的影响 有生育神经管缺陷（NTDs）婴儿危