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- 2019-10-23 发布于天津
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(五)核酸的复性(退火) :变性核酸的互补链在适当条件下重新缔合成双螺旋的过程。 影响复性速度的因素: (1)单链片段浓度 (2)单链片段的大小 (3)片段内重复序列的多少 (4)溶液离子强度的大小 (5)溶液温度的高低 (T – 25℃) (六)分子杂交 :在退火条件下,不同来源的DNA互补区形成氢键,或DNA单链和RNA链的互补区形成DNA-RNA杂合双链的过程。 探针:用放射性同位素或荧光标记的DNA或RNA片段。 原位杂交技术:直接用探针与菌落或组织细胞中的核酸杂交,未改变核酸所在的位置。 点杂交:将核酸直接点在膜上,再与核酸杂交。 Southern印迹法:将电泳分离后的DNA片段从凝胶转移到硝酸纤维素膜上,再进行杂交。 Northern印迹法:将电泳分离后的RNA吸印到纤维素膜上再进行分子杂交。 七、核酸的序列测定 目前多采用Sanger的酶法和Gilbert的化学法 O HOH2C H H OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N N N H H H H 9 腺嘌呤 ddATP P P P 八、核酸的生物学功能和实践意义 核酸是基本遗传物质,在蛋白质的生物合成上又占有重要位置,因而在个体的生长、生殖、遗传、变异和转化等一系列生命现象中起决定性作用。 (一)核酸与遗传信息的传递 DNA是基本遗传物质 有了一定结构的DNA,才能产生一定结构的蛋
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