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响应面法优化豆粕发酵产共轭亚油酸条件赵蓉蓉桑卫国( 宁波大学海洋学院，宁波315211)摘 要 为寻求以豆粕为主要基质产共轭亚油 响应面法优化豆粕发酵产共轭亚油酸条件 赵蓉蓉 桑卫国 ( 宁波大学海洋学院，宁波 315211) 摘 要 为寻求以豆粕为主要基质产共轭亚油酸最佳发酵条件，采用响应面法优化其发酵条件。在单因 素试验基础上，选择不同接种量、油脂添加量、发酵时间为自变量，共轭亚油酸产量为响应值，利用 Box － Benhnken 中心组合方法进行 3 因素 3 水平的试验设计，并做响应面分析，建立回归模型。结果表明，回归方程 拟合性好，发酵最优条件为: 接种量 3 ． 2 % ，油脂添加量 1 ． 93 g·( 50 g 豆粕) － 1 ，初始 pH 6 ． 0 ，在 37 ℃ 发酵 80 h。在此条件下，发酵豆粕中共轭亚油酸产量可达 700 ． 32 μg / g。这为生物发酵法生产共轭亚油酸提供研 究基础。 关 键 词 豆粕 共轭亚油酸 响应面分析 中图分类号: TS225． 1; 文献标识码: A 文章编号: 1003 － 0174( 2012) 12 － 0062 － 07 Q939． 11 + 7 近年来，一种被誉为“奇异天然营养素”的营养 品在国外市场上流行起来，就是共轭亚油酸( Conju- gated Linoleic Acid，CLA) 。它是一系列含有共轭双 键，具有位置和几何异构效应的亚油酸( LA) 异构体 总称。最初是在反刍动物的肉和乳制品中发现的一 种不饱和脂肪酸［1］。在自然界中，CLA 存在于肉类、 家禽、海鲜、奶酪、黄油、牛奶以及植物油等多种食物 中，尤以反刍动物的乳制品中含量最丰富［2 － 3］。CLA 以其独特而多样的生物活性作用而广受大家关注。 近些年研究发现，CLA 具有减少脂肪累积和改变脂 肪代谢，抑制肿瘤和动脉粥样硬化的发生，增强机体 免疫功能等功能，但其来源有限而动物不能自行合 成［4 － 5］。CLA 的制备方法主要有化学合成法和生物 转化法。化学合成法主要指亚油酸碱法异构化合成 CLA，但合成的 CLA 异构体组成复杂，不利于产品的 开发和利用。生物转化法条件温和，得到的 CLA 异 构体组成单一，与天然食物中的 CLA 异构体组成相 似。据报道，有来自 14 个属的 250 多种细菌能将亚 油酸转化为共轭亚油酸，主要有肠球菌属( Enterococ- cus) 、链球菌属( Streptococcus) 、片球菌属( Pediococ- cus) 、丙酸杆菌属( Propionibacterium) 、乳杆菌属( Lac- tobacillus) 等，以乳杆菌属的植物乳杆菌研究最多，效 果亦最优［6 － 11］。杜波［12］ 从玉米青贮中分离到一株 能将亚油酸转化成 CLA 的植物乳杆菌( ANCLA01 ) ， 在优化工艺条件下，每毫 升 发 酵 液 中 CLA 含 量 达 47． 03 μg。梁新乐［13］自行分离筛选获得一株植物乳 杆菌 HSC235 菌株，具有转化生成共轭亚油酸的能 力。对 HSC235 菌株静息细胞转化亚油酸生成共轭 亚油酸的反应条件进行了单试验，获得较佳反应条 件参数，共轭亚油酸产量最高可达 1 ． 755 mg / mL。 Lee 等［9］对 CLA 微胶囊制备工艺进行了研究，提高 了 CLA 的包含率及稳定性，为 CLA 的生产销售提 供便捷。豆粕经过微生物发酵，不仅常规营养得到 改善，产生大量的菌体蛋白，使蛋白含量增加，而且 其中的抗营养因子含量大大降低，微生物产生的各 类消化酶类可有效地降解其中的抗营养因子和大 分子营养物质，并富含多种生物活性因子，是一种 ［14］ 优质的新型蛋白源 。 目前，国内外已有不 少 研 究表明，发酵豆粕可以适量替代水产动物饲料中的 ［15 － 16］。 鱼粉 之前研究者大都集中于以亚油酸为底 物，液体发酵生产 CLA，而固态发酵豆粕生产 CLA 的报道甚少。 因此，对以豆粕为培养基，植物乳杆 菌为出发菌株，发酵生产 CLA 的研究具有重要 意 义。 材料与方法 1 1． 1 菌株 基金项目: 宁波市科技局项目( 2010C10059) ，宁波市自然科学基 金( 2010A610007) 收稿日期: 2012 － 03 － 20 作者简介: 赵蓉蓉，女，1988 年出生，硕士，食品生物工程 通讯作者: 桑卫国，男，1955 年出生，副教授，硕士生导师，食品生 植物乳杆菌突变株 Lactobacillus plantarum Nb1: 本实验室分离保存。 1． 2 培养基及试剂 萝卜( 品种: 超级春白玉) ，黄豆芽，食用调和油 物技术 第 27 卷第 12 期赵蓉蓉等