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生 物 工 程 学 报 李国辉 等/创建可视化的家蚕杆状病毒表达系统表达家蚕二分浓核病毒非结构蛋白NS1 625
Chinese Journal of Biotechnology
/cjbcn April 25, 2014, 30(4): 625−635
DOI: 10.13345/j.cjb.130436 ©2014 Chin J Biotech, All rights reserved
生物技术与方法
NS1
李国辉，王鹏，李芒芒，徐五，胡朝阳，姚勤
212013
, , , . NS1.
, 2014, 30(4): 625−635.
Li GH, Wang P, Li MM, et al. Expression of ns1 gene from Bombyx mori bidensovirus by a novel Baculovirus expression
system. Chin J Biotech, 2014, 30(4): 625−635.
摘 要: 重组杆状病毒感染昆虫细胞是表达外源蛋白常用的一种方法。为有效鉴定转染的细胞中是否产生了重
组病毒粒子，对质粒pFastBacI 进行改造，构建了极早期基因ie1 启动子控制的绿色荧光蛋白egfp 基因表达盒，
以及多角体基因启动子控制的外源DNA 的一个通用型双表达载体；通过酶切、连接的方式，将家蚕二分浓核
病毒 ns1 基因连接到多角体启动子下游；在转座酶的介导下，该供体质粒上部分序列可转座到穿梭载体
Bm-Bacmid 上，进而构建可同时表达egfp 和ns1 基因的重组杆粒。将构建的该重组杆粒DNA 转染BmN 细胞，
通过观察可视化的绿色荧光信号，可迅速判定转染后的细胞中重组病毒粒子产生的情况，收集转染后的细胞培
养上清，将其感染BmN 细胞，对感染4 d 后的细胞总蛋白进行Western blotting 分析，结果表明能杂交到一条
36 kDa 大小的特异蛋白，表明NS1 蛋白成功获得了表达，进而为深入研究ns1 基因的功能奠定了基础。
: 杆状病毒，基因表达，家蚕二分浓核病毒，非结构蛋白NS1
Received: August 26, 2013; Accepted: December 18, 2013
Supported by: National Natural Science Foundation of China (Nos. , Startup Scientific Research Fund from
Jiangsu University (No. 09JDG057).
Corresponding author: Guohui Li. Tel: +86-511 E-mail: 1000003593@
(Nos. (No. 09JDG057)
626 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q Chin J Biotech April 25, 2014 Vol.30 No.4
Expression of ns1 gene from Bombyx mori bidensovirus by a
novel Baculovirus expression system
Guohui Li, Peng Wang, Mangmang Li, Wu Xu, Zhaoyang Hu, and Qin Yao
Institute of Life Science, Jiangsu University , Zhenjiang 212013, Jiangsu , China
Abstract: Baculovirus gene expression is the most popular method to make target protein in cul
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