胡付品--不常见药敏结果阅读.pdfVIP

不常见细菌耐药表型结果探讨 不常见细菌耐药表型结果探讨 胡付品 胡付品 华山医院抗生素研究所 华山医院抗生素研究所 药物敏感性试验方法 药物敏感性试验方法  稀释法  试管稀释法（肉汤稀释法）  平板稀释法（琼脂稀释法）  微量肉汤稀释法  扩散法（纸片法）  Kirby-bauer （K-B ）法  E-test  自动化仪器 纸片扩散法 纸片扩散法  原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板 上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，因此敏感细菌在纸 片周围一定距离内的生长受到抑制。 如何制备菌悬液？ 如何制备菌悬液？ 正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以 正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以 及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径 及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径 要使用透射光 不要用反射光反射光 透射光 抑菌圈内有菌落，怎么办? 抑菌圈内有菌落，怎么办? 铜绿假单胞菌有耐药菌落 大肠埃希菌污染肠球菌； 铜绿假单胞菌有耐药菌落 大肠埃希菌污染肠球菌； 菌落再次纯分 菌落再次纯分 第1问：如何解释阿米卡星对大肠埃希菌的抑菌现象？ 第1问：如何解释阿米卡星对大肠埃希菌的抑菌现象？ 厄他培南 阿米卡星 药物：青霉素G 药物：青霉素G 细菌：β-溶血性链球菌 细菌：β-溶血性链球菌 J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131 矛盾的现象 (Eagle现象) 矛盾的现象 (Eagle现象)  指抗菌药物在高浓度的时候反而降低杀菌活性  这种现象第一次由Eagle和Musselman两位科学家 发现并报道。  青霉素类抗菌药物在作用于葡萄球菌、β溶血性 链球菌以及肠球菌时出现药物低浓度（仍超过 MIC值）时抗菌活性好于高浓度。 J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131 可能的机制？(感谢邵海枫教授提供研究结果) 可能的机制？(感谢邵海枫教授提供研究结果)  诱导至第20代，阿米卡星纸片周围的双圈表型与传代前一致（图1 ）；  20代以后，实验菌株开始在抑菌圈中出现散在菌落；随着传代数增 加抑菌圈中菌落密度逐渐增加，抑菌圈间隙变小；  第30代，抑菌圈完全消失（图2 ）。  双圈耐药菌株均检测到armA基因，且经阿米卡星诱导后的菌株中armA 基因的mRNA表达量较诱导前有明显上升的趋势。  由此推测armA基因诱导型表达介导了双圈现象的产生。  但armA基因测序未发现碱基突变，排除基因突变可能 图1 图2 第2 问：如何解释万古霉素E-试验结果？ 第2 问：如何解释万古霉素E-试验结果？  万古霉素依赖的粪肠球菌  长期使用包括糖肽类、氨基糖肽类等  抗生素压力下，必须依赖万古霉素才能生长 The change at the ninth codon resulted in the inactivation of the ddl gene and