大黄素对HL60细胞增殖和凋亡的影响.docVIP

PAGE PAGE 1 大黄素对HL-60细胞增殖和凋亡的影响 　　摘要：目的：探讨大黄素对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响。方法：应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响；应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡；蛋白印迹法(Western-Blot)检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果：在5～20mg/L浓度范围内，大黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用呈时间剂量依赖性20mg/L作用72h后，抑制率分别达到（19.8±2.7）%，（58.8±4.4）%和（73.8±5.7）%；流式细胞术检测发现：大黄素5、10和20mg/L作用24h后，细胞凋亡率分别为（15.5±3.4）%、（56.0±3.4）%和（71.1±5.0）%，与对照组（1.01±0.06）%有显著性差异（P 　　关键词：大黄素；HL-60细胞；细胞增殖；细胞凋亡；bcl-2 　　中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717(2011)12-2764-03 　　EffectofEmodinonInducingHL-60Cellsof 　　ProliferationInhibitionandApoptosis 　　WANGXiao,QIANXudai,CHENXiaohong,YINLiming,LINXiaojie,GAORuilan 　　(InstituteofHematology,theFirstAffiliatedHospitalofZhejiangUniversityofTCM,Hangzhou310006,Zhejiang,China) 　　Abstract:Objective：ToinvestigatetheeffectofemodinoninducingHL-60leukemiacellsofproliferationinhibitionandapoptosis.Methods：HL-60cellswereexposedtoemodinatdifferentdosages.GrowthinhibitionwasdetectedbyMTTassay,andcellapoptosiswasdetectedbyflowcytometryandDNAagarosegelelectrophoresis.Theexpressionofbcl-2wasdetectedbyWestern-blot.Results：TheresultsshowedthatwhenHL-60cellsweretreatedwith5-20mg/Lofemodin,theproliferationofHL-60cellswasobviouslyinhibitedindose-dependentandtimedependentmanner.TheproliferationrateofHL-60cellstreatedwithemodinfor72hourwere（19.8±2.7）%，（58.8±4.4）%and（73.8±5.7）%.24hoursafterexposureto5,10,20mg/Lemodin,theapoptoticratesofHL-60wererespectively（15.5±34）%、（56.0±3.4）%and（71.1±5.0）%,andwerestatisticallysignificantwhencomparedwiththecontrolgroup（1.01±0.06）%（P 　　Keywords:Emodin;HL-60cell;cellproliferation;cellapoptosis 　　细胞凋亡在维持机体处于稳定状态中起着重要作用，细胞凋亡异常与人体多种恶性肿瘤的发生发展过程密切相关。白血病是严重危害人类健康的恶性血液病，化疗虽然是目前主要的治疗手段，但其副作用及耐药性已成为临床上治疗白血病的极大障碍。大黄素(emodin)属单蒽核类，1,8-2二羟基蒽醌衍生物，与阿霉素、柔红霉素等抗癌药同属蒽醌类化合物，是大黄、虎杖、何首乌、望江南、砂仁及百合等多种中药的有效成分之一。大黄素药理作用广泛，具有免疫调节、抗菌、抗炎、抗肿瘤等方面的作用\[1-2\]。 　　近年来，大黄素抗肿瘤的作用已经引起的研究者的极大关注\[3\]。目前对其抗癌作用的研究主要集中在实体瘤方面，对于非实体瘤作用的研究报道较少。本实验以HL-60白血病细胞作为靶细胞，研究大黄素对其抑制增殖和诱导凋亡的作用以及对Bcl-2蛋白表达水平的影响。 　　1材料和方法 　　1.1实验材料大黄素为Sigma公司产品，纯度99%，用二甲基亚砜(DMSO),Sigma公司溶解,-20℃；IMDM培养液购自Gibco