婴幼儿食品和乳品中维生素AE的测定.pdf

北京东西分析仪器有限公司 婴幼儿食品和乳品中维生素A、E 的测定 一、方法提要 维生素A 和维生素E 是机体维持正常代谢和机能必需的脂溶性维生素。对 婴幼儿的发育,上皮组织的完整性,视力,生殖器官,血钙和磷的恒定,骨骼,牙的生长 发育有重要作用。 本文根据《食品安全国家标准—婴幼儿食品和乳品中维生素 A、D、E 的 测定》中提供的方法进行分析测定。将试样皂化后，经石油醚萃取，维生素A、 E 用反相色谱法分离，外标法定量。 二、试剂及标准溶液配制 2.1 2.1 22..11 试剂 无水硫酸钠： 分析纯。 乙醇：色谱纯。 氢氧化钾水溶液：称取固体氢氧化钾 250 g,加入 200 ml 水溶解。 石油醚：沸程 30 ℃～ 60 ℃。 甲醇：色谱纯。 正己烷：色谱纯。 环己烷：色谱纯。 C 15 g/L 维生素 的乙醇溶液（ ）。 2.2 2.2 22..22 标准溶液配制 2.2.1 维生素 A 标准储备液（视黄醇）（100 μg/mL）：精确称取 10 mg 的维生 素 A 标准品，用乙醇溶解并定容于 100 mL 棕色容量瓶中。 2.2.2 E - 500 g/mL 50 mg 维生素 标准储备液（α生育酚）（ μ ）：精确称取 的维 生素 E 标准品，用乙醇溶解并定容于 100 mL 棕色容量瓶中。 （注：维生素A、E 标准储备液均须 -10 ℃以下避光储存。标准工作液临用前配制。 标准储备溶液用前需校正。） 三、仪器及工作条件 3.1 3.1 33..11 仪器 高效液相色谱仪，带紫外检测器。 北京东西分析仪器有限公司 旋转蒸发器。 恒温磁力搅拌器：20 ℃～ 80 ℃。 氮吹仪。 离心机：转速≥5000 转/分钟。 培养箱：60 ℃±2 ℃。 天平：感量为 0.1 mg。 3.2 3.2 33..22 色谱条件 色谱柱：C18 柱，250 mm ×4.6 mm，5 μm，或具同等性能的色谱柱。 流动相：甲醇。 流速：1.0 mL/min。 检测波长：维生素A：325 nm；维生素E：294 nm。 柱温：35 ℃±1 ℃。 进样量：20 μL。 四、分析步骤及分析结果 4.1 4.1 44..11 试样处理 4.1.1 含淀粉的试样 5 g 50 g 0.1 mg 250 mL 称取混合均匀的固体试样约 或液体试样约 （精确到 ）于 三角瓶中，加入l g α-淀粉酶，固体试样需用约50 mL 45 ℃～ 50 ℃的水使其 溶解，混合均匀后充氮，盖上瓶塞，置于60 ℃± 2 ℃培养箱内培养30 min。 4.1.2 不含淀粉的试样 称取混合均匀的固体试样约10 g 或液体试样约50 g（精确到0.1 mg）于250 mL 三角瓶中，固体试样需用约50 mL 45 ℃～ 50 ℃水使其溶解，混合均匀。 4.1.3 皂化： 100 mL C 于上述处理的试样溶液中加入约 维生素 的乙醇溶液，充分混匀 后加25 mL 氢氧化钾水溶液混匀，放入磁力搅拌棒，充氮排出空气，盖上胶塞。 1000 mL 的烧杯中加入约 300 mL 的水，将烧杯放在恒温磁力搅拌器上，当水 温控制在 53 ℃ ±