湖北野生桑黄分离鉴定及培养研究.pdf

20 17 年第2 期 蚕丝科技 总第141 期 湖北野生桑黄分离鉴定及培养研究 波 周洪英 吴洪丽 （湖北省农业科学院经济作物研究所，武汉430070 ） 摘要 采用子实体组织分离法对桑黄（ ）进行分离，采用内转录间隔区序列 分析对样品进行分子鉴定，用桑叶提取物对桑黄进行培养。结果表明，不同浓度桑叶提取物对 桑黄生长存在不同程度的影响，最佳添加浓度为0.5%。在基础PDA 培养基中添加0.5%桑叶提 取物，桑黄生长速度为3.5mm/d ，与基础PDA 培养基存在极显著差异。液体培养，菌丝体生物量 达到11.7g/L 。桑叶提取物对桑黄菌丝体生长具有一定的促进作用。 关键词 桑黄；桑叶提取物；生长速度；液体培养 桑黄（ ）俗称桑臣、桑耳 研究桑叶提取物对桑黄生长的影响，为下一 或胡孙眼等，是寄生于桑树等阔叶树上的一 步人工栽培研究奠定基础。 种多年生珍贵药用真菌，《神农本草经》《本草 纲目》等均有记载，有“森林黄金”的美称。桑 1 材料与方法 黄含有多种活性物质，如多糖、黄酮和三萜类 物质。研究表明，桑黄多糖能促使肿瘤细胞自 1.1 材料 我毁灭，防止肿瘤细胞附着于体内并抑制转 野生桑树桑黄由本课题组于20 15 年4 移，抑制率达96.78% ，是国际公认的最有效的 月从湖北西部山区桑树上采集得到，系湖北 抗癌真菌，其突出的抗肿瘤功效在日、韩等国 省内首次发现。 备受关注，具有极大的药用价值和开发潜 桑叶提取物（MLE ）：取鲜桑叶，60 ℃烘干， [1] 取烘干桑叶 500 g ，加 1 500mL 沸水浸提 力 。不同树种桑黄活性物质含量差异较大， [2-4] 30min ，过滤，浓缩烘干提取液，得 MLE ；马铃 以桑树桑黄含量最高 。 中国野生桑黄主要分布在东北、华北、西 薯葡萄糖（PDA ）培养基：马铃薯200g ，去皮切 北及四川、云南等地。本课题组首次在湖北省 丁，沸水煮20min ，取滤液，加葡萄糖20g ，加热 内采集到野生桑树桑黄，对其进行分离鉴定， 溶解，补足水 1 000mL ，pH 自然；葡萄糖蛋白 胨培养基：葡萄糖20g ，蛋白胨5g ，水 1 000 基金项目 国家蚕桑产业技术体系武汉综合试验站 mL ，pH 自然；MLE 培养基：取一定量MLE ，加 项目（CARS-22-SYZ15）；湖北省农业技术创 水加热溶解，pH 自然；PDA-MLE 培养基：取 新中心资助项目（2009-620-006-003 ）。 PDA 培养基，加入一定量MLE ，加热溶解，pH 第一作者 孙波（1981—），山东肥城人，助理研究员， 硕士，蚕桑资源综合利用。 自然。 E-mail ： 1.2 仪器与试剂 163.com 通信作者 吴洪丽，女，研究员。E-mail：wuhl00 1@163.com Thermo Sorvall Biofuge Primo R 型高速冷 1 20 17 年第2 期 丝科技 总第141 期 冻离心机（美国Thermo 公司）；TaKaRa TP600 数据处理采用SAS 9.0 软件进行统计分析。 型 PCR 仪 （日本 TaKaRa 公司）；Applie