发酵工艺学-菌种选育.pptVIP

固体培养基四区划法接种法 固体培养基的稀释涂抹接种法 【目的】用来分离单一菌落或用来估计样本中微生物的数目。 取出试管中的第一次十倍稀释菌液1mL， 加入另一个新的含9mL无菌水的试管中。 重复此步骤直至所需要的稀释浓度。 从最后稀释菌液中吸取 0.1mL菌液，置入准备好的无菌琼脂内。 将三角玻璃棒浸于酒精中 将三角玻璃棒在火焰上燃烧 （须注意勿使燃烧中的酒精滴入酒精瓶中，引起燃烧） 使用玻璃棒将菌液均匀涂布开来，将培养皿置于恒温培养箱中隔天观察菌落数目，再依照稀释倍数推算出菌液浓度。 4. 生产性能的测定 一般采用两步法： 初筛：以量为主 复筛：以质为主 二、诱变育种 用各种物理、化学的因素人工诱发基因突变。 诱变剂：能够提高生物体突变频率的物质。 诱变剂 物理：紫外线，快中子 化学：硫酸二乙酯，亚硝基胍 { 诱变育种的主要环节 （1）以合适的诱变剂处理细胞悬浮液 ——诱变 （2）用合适的方法淘汰负效应变异株， 选出性能优良的正变异株——筛选 第三节 生产菌种的改良 一、原生质体融合（protoplast fusion） 1.标记菌株的筛选 2.原生质体的制备 3.原生质体的融合与再生 聚乙二醇（PEG）－脱水