动物细胞工程(2).pptVIP

B淋巴细胞 动物在免疫过程中产生的抗体种类可达百万种 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 但是： 一个B淋巴细胞在体外不能无限增殖 . . 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 单克隆抗体 问题讨论 提示： 1 .什么样的细胞可以产生抗体？ 2 . 什么样的细胞可以无限增殖？ 瘤细胞和癌细胞有何区别？ 共同点：两者都有无限增殖的能力 不同点：瘤细胞不能转移 定义 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞，能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 （选择培养基） 单克隆抗体 ①诊断疾病（识别作用，如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等） 单克隆抗体的应用 优点：准确、高效、简易、快速 ②用于治疗疾病和运载药物（主要用于癌症治疗，也可运载药物，如 “生物导弹”） （导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤） （位置准确、疗效高、副作用小） 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 ——灭活病毒 一个新细胞——杂交瘤细胞 一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势 单克隆抗体 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 只有杂种细胞才能活 动物细胞培养 3.单克隆抗体制备过程 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 * 专题2.2动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 思考题： 1、健康动物中选幼龄的还是更大一些的? 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。 成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。 3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。 4、细胞膜的主要成份是什么？ 蛋白质和磷脂 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 回忆动物细胞培养的过程？ 幼龄动物 剪碎组织 胰蛋白酶处理 单个细胞 原代细胞培养 取动物器官 和组织 细胞悬浮液 传代细胞培养 细胞接触抑制 原代培养：将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养：用胰蛋白酶将出现接触抑制的贴壁细胞从培养瓶壁上脱离下来，制成细胞悬液，分装到多个培养瓶中继续培养，这个过程叫传代培养。 1、无菌、无毒的环境 保证细胞顺利的生长增殖 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 动物细胞培养的条件 2、营养 3、温度和PH 培养室中控制,使之达到 36.5 ± 0.5℃, 7.2~7.4 培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、气体环境： 植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的 细胞 培养基特有成分 、植物激素 营养成分、 培养结果 植物体 培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株 获得 全能性 增殖 营养成分 动物血清 细胞株、细胞系 细胞,某些蛋白质 动物细胞培养技术的应用 （3）细胞的生理、药理、病理研究 （1） 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 （2） 基因工程的受体细胞 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 黑面绵羊去核卵母细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 1.动物细胞核移植的概念： 核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物：用核移植的方法得到的动物。 2.分类： 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复 全能性容易 细胞分化程度高，恢复 全能性困难 3、过程 4、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、生产医用蛋白质 及组织器官的移植的供体 5