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- 2019-11-15 发布于上海
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第四章 基因工程载体vectors一、载体 (Vectors)广义上通常把能携带外源基因进入受体细胞的运载工具叫载体。在基因工程操作中,把能携带外源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体。2.基因工程对载体的要求(1)具有对受体细胞的可转移性,可提高载体导入受体细胞的效率。(2)具有与特定受体细胞相适应的复制原点或整合位点,使得外源基因可在受体细胞中大量繁殖或稳定遗传。(3)具有多种单一的核酸酶切位点(多克隆位点),可用于外源基因的插入,同时不影响载体的扩增和繁殖。(4)具有合适的选择标记,便于重组DNA分子的检测。(5)具有较好的安全性,不能任意转移,避免基因的非控制性扩散,给人类造成危害3. 载体 的种类 基因工程中常用的载体有5类: 质粒(plasmid) 单链DNA噬菌体M13 ?噬菌体的衍生物 柯斯质粒(cosmid) 动物病毒(virus) 来源克隆载体: 克隆一个基因或DNA片段表达载体: 用于一个基因的蛋白表达整合载体: 把一个基因插入到染色体组中功能第一节 质粒载体 一、质粒(plasmid) 是独立于染色体以外的能自主复制的双链闭合环状DNA分子。存在于细菌、霉菌、蓝藻、酵母等细胞中。大肠杆菌的质粒1. 质粒的一般生物学特性(1)分子小: 1—500 kb(2)编码基因少: 2—3个中等大小的蛋白质。 如抗菌素抗性、代谢特征等,赋予细菌一些额外的特性(非必须
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