不同缓冲体系的牛血清白蛋白插层蒙脱石效果.pdf

第 30 卷 　第 6 期 华 侨 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) Vol . 30 　No . 6 　 　 　2009 年 11 月 J ournal of Huaqiao U niver sit y (Nat ural Science) Nov . 2009 　 文章编号 : 　100050 13 (2009) 06066 104 　 不同缓冲体系的牛血清白蛋白插层蒙脱石效果 吕英海 , 周仕学 , 李桂江 , 王 　斌 , 吕东琴 ( 山东科技大学 化学与环境工程学院 , 山东 青岛 2665 10) 摘要 : 　利用离子交换的原理 ,研究等电点两侧的不同p H 值 、不同缓冲体系对牛血清白蛋白插层蒙脱石效果 的影响. 结果发现 ,p H 值对蒙脱石插层影响显著 在采用低于蛋白质等电点的p H 值且利用乙酸乙酸钠作 为缓冲体系时 ,蛋白质的插层容易造成蒙脱石层间的剥离. 等电点两侧的p H 值不同 ,会造成蛋白质插入量的 显著差异. 热重分析表明 ,蛋白质/ 蒙脱石复合物的热稳定性有一定程度的提高. 关键词 : 　蒙脱石 ; 牛血清白蛋白; 插层 ; p H 值 ; 缓冲液 中图分类号 : 　TB 383 . 02 1 文献标识码 : 　A 纳米复合材料中一相为有机聚合物 ,另一相为无机相时 ,称为有机无机纳米复合材料. 这种复合材 料不是有机相与无机相的简单混合 ,而是两相在纳米尺寸范围内复合而成的 ,从而产生许多特异的性 [ 13 ] ( ) 能 ,在生物学等领域展现出广阔的应用前景 . 蒙脱石 MM T 具有耐化学溶剂 、粒径小 、晶层可被嵌 入 、比表面积大和易于吸附分子等特点[4 ] . 通过离子交换反应 ,可改变 MM T 晶体表面的化学性质 ,这为 ( ) ( 制备蛋白质/ 蒙脱石混杂复合材料奠定了基础. 牛血清白蛋白 B SA 晶体呈等边三角形 宽为 14 nm ,高 为 4 nm) ,在溶液中的等电点为 4 . 8[ 5 ] B SA 可与多种阳离子 、阴离子及其他小分子物质结合 ,常用作研 [ 5 ] 究蛋白质复合材料的模式蛋白;B SA 可以逐步插层 进入蒙脱石 研究 B SA 与蒙脱石的相互作用 ,有 助于了解酶与粘土矿物的作用机制[ 6 ] ,对药物负载 、可降解材料等方面的研究也具有重要意义. 本文主 要研究不同p H 值下 ,不同缓冲体系对牛血清白蛋白插层蒙脱石效果的影响. 1 　实验部分 1 . 1 　材料 ( ) 钠基蒙脱石 吉林省长春市 , 利用静沉降法提纯蒙脱石原土 , 提纯后加入体积分数为 10 % 的 ( ) H O ,煮 2 h 以去除有机物 ,过 200 目筛备用 ;牛血清白蛋白 分析纯 ,美国 Sigma 有限公司 ,在分析天 2 2 平上准确称量少量牛血清白蛋白,溶解到 100 mL 蒸馏水中 ,按照 Folin 酚方法测定蛋白质标准曲线[7 ] ; 其他药品均为分析纯. 1 . 2 　蒙脱石对牛血清白蛋白的吸附 分别配制浓度为 0 . 05 mol ·L - 1 ,p H 值为 4 . 6 的乙酸乙酸钠 、磷酸氢二钠柠