“电针调节Noggin表达对VD大鼠学习记忆过程中海马神经发生的.docVIP

“电针调节Noggin表达对VD大鼠学习记忆过程中海马神经发生的影响”申请书正文 1、项目研究意义 随着人类社会进入21世纪，人口老龄化更加明显，老年期痴呆成为一个严重的医学和社会问题，而受到世界各国的关注。在我国，血管性痴呆是老年期痴呆的主要类型之一，且其发病率有逐年上升的趋势。血管性痴呆（vascular dementia，VD）是由脑血管因素导致脑组织损害引起的智能及认知功能障碍的临床综合征。研究显示[1]，约25％的脑卒中患者伴有程度不等的智能障碍，严重者不仅影响患者的生存质量，而且增加了社会和家庭的经济负担。 海马是目前公认与学习、记忆等高级神经功能活动具有密切关系的重要脑区，而海马最受缺血低氧的损害造成神经结构和功能的异常改变，成为痴呆等疾病的主要病理基础。新近研究表明，新生及成年哺乳动物与人的海马区域存在着神经发生（神经干细胞，neural stem cell，NSC），为人们深入研究海马功能及防治缺血性神经疾病提供了新的研究途径。血管性痴呆是迄今为止唯一可以预防的痴呆类型，早期积极预防治疗具有可逆性。采用针灸促进海马内神经发生向神经元方向分化并在脑组织内整合，对海马神经可塑性进行调节，改善学习记忆功能，无疑对VD的基础与临床研究具有重大意义。 干细胞是当前生命科学的研究热点，《Science》将干细胞研究评为21世纪最重要的十项研究领域之首，为世人瞩目。正是因为干细胞的特殊科学意义及其在医学上的应用前景，世界各国对此都投入大量的人力、财力进行有关基础和应用的研究。随着我省经济的发展，人民生活水平的提高，老年人口不断增加，而老年期痴呆、脑血管病等重大疾病也因之而增多。从新的思路研究这些疾病的发病机理和探索有效治疗方法，势必为提高我省人口健康水平有积极的促进作用。本项目的研究也正是基于理念而申请的立项的。 2、项目研究目标及与申请者研究工作长期目标的关系 2.1 研究目标 开展对实验性VD大鼠的发病机理研究，证实海马的神经发生障碍是血管性痴呆的病理基础。进行电针对拟VD大鼠的治疗观察，在肯定疗效的基础上，结合现代医学的研究理论与技术，深入探讨针灸治疗血管性痴呆的海马神经发生作用机制。 2.2 与申请者研究工作长期目标的关系 申请者长期从事针灸治疗缺血性脑血管疾病的临床与作用机制研究，特别是对针刺治疗缺血性脑血管病的临床与实验有较深入的研究。申请者设计并实施完成2003年度广东省自然科学基金“电针对局灶性脑缺血大鼠内源性神经干细胞影响的研究”（No.31458，排名第二）；参与完成国家自然科学基金“针刺对局灶性脑缺血后突触可塑性促进作用的研究”（No排名第五）和国家中医药管理局科研基金“针刺调节神经营养因子对缺血后脑可塑性促进作用的研究”（No.02-03JP36，排名第五）等项目。这为开展本项目的研究在相关技术和实验经验等方面提供了有力的支持。在上述研究基础上，本项目拟通过电针调节神经诱导因子Noggin基因的表达以调控VD大鼠海马神经发生机制，探讨针灸治疗VD的作用机理，为探索新的临床治疗方法、提高疗效，提供具有指导价值的科学依据。 3、项目研究内容，研究方案和进度安排 3.1 研究内容 本项目从中西医结合基础的角度，研究针刺治疗VD的海马神经发生机制，从调节脑与神经发育密切相关的神经诱导因子Noggin基因的表达为切入点，观察VD及电针治疗时海马神经发生的变化规律，新生神经细胞的增殖、迁移与分化，结合相应神经行为学的改变应用透射电镜从体视学角度证实其功能性突触的重建，探讨Noggin等在治疗VD时对神经发生的影响作用。旨在阐明针灸治疗VD的神经生物学作用机制，为针灸治疗缺血性脑血管疾病提供科学依据。具体如下： 1）观察VD大鼠造模后Noggin基因的表达情况，海马神经细胞丢失及病理形态学变化情况及齿状回（DG）神经发生的规律，电针治疗后三者的变化情况： a．造模后不同时相Noggin的表达情况及电针干预后的变化； b．造模后不同时相海马神经细胞丢失的情况与VD大鼠神经行为学及齿状回LTP之间的关系； c．造模后不同时相海马齿状回（DG）新生神经细胞的变化规律及电针干预对其影响； d．造模及电针干预不同时相上VD大鼠神经行为的变化及LTP的诱导情况。 2）在上述研究工作的基础上，分析电针治疗VD的可能的作用机制： a．研究脑与神经发育的神经诱导因子Noggin与海马神经发生（增殖、迁移、分化及功能性突触的形成）的关系； b．研究大鼠海马神经发生情况与VD神经行为学及CA3神经突触重建情况的内在关系； c．证实电针治疗VD大鼠的机制是否通过影响海马神经发生而发挥作用。 3.2 研究方案 ⑴动物模型 健康雄性老龄SD大鼠（12～15个月），体重350～500g。经Y-迷宫训练筛选后选择学习记忆成绩