GgamiR7b和靶基因SNCA在两品系鸡脾脏中的.pdf

江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．），２０１９，３５（４）：８７４～８７９ ８７４ ｈｔｔｐ：／ ／ ｗｗｗ．ｊｓｎｙｘｂ．ｃｏｍ 肖春婷，廉传江，易　 诚，等． Ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ和靶基因ＳＮＣＡ在两品系鸡脾脏中的表达分析［Ｊ］．江苏农业学报，２０１９，３５（４）：８７４⁃８７９． ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃４４４０．２０１９．０４．０１８ Ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ和靶基因ＳＮＣＡ 在两品系鸡脾脏中的 表达分析 １，２ ２ ３ １，２ 肖春婷 ，　 廉传江 ，　 易　 诚 ，　 陈洪岩 （１．东北农业大学生命科学学院，黑龙江 哈尔滨 １５００３０； ２．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所／ 兽医生物技术国家重点实验 室／ 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室，黑龙江 哈尔滨 １５００６９； ３．东北林业大学生命科学学院，黑龙江 哈尔滨 １５００４０） 　 　 摘要：　 为确定 ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ 与ＳＮＣＡ 的靶向关系以及检测他们在ＭＤＶ超强毒株Ｍｄ５感染ＳＰＦ抗性鸡（Ｂ２１单 倍型）和易感鸡（Ｂ１９单倍型）后５ ｄ、１４ ｄ、２５ ｄ脾脏中的表达量。 利用ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ、ｍｉＲＢＤ软件预测ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ的靶 基因，通过双荧光素酶报告基因检测系统体外验证ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ与ＳＮＣＡ 之间的靶向关系。 ｑＲＴ⁃ＰＣＲ检测ＳＮＣＡ 和 ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ在Ｂ２１、Ｂ１９感染Ｍｄ５脾脏中的表达量。 荧光素酶活性结果显示，ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ与ＳＮＣＡ⁃ｗｔ⁃３′ＵＴＲ共转染 后显著抑制萤火虫荧光素酶活性（Ｐ＜００５），对ＳＮＣＡ⁃ｍｕｔ⁃３′ＵＴＲ活性无显著影响。 ｑＲＴ⁃ＰＣＲ结果显示，ＳＮＣＡ 在 Ｂ２１、Ｂ１９ 中，Ｍｄ５感染 ５ ｄ 均显著上调表达（Ｐ＜００５），Ｍｄ５ 感染 ２５ ｄ 时ＳＮＣＡ 在 Ｂ２１ 中极显著上调表达（Ｐ＜ ００１），在Ｂ１９ 中极显著下调表达（Ｐ＜００１）。 ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ在Ｍｄ５感染１４ｄ，在Ｂ２１中显著上调表达而在Ｂ１９ 中显著 下调表达（Ｐ＜００５），Ｍｄ５感染２５ ｄ，ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ在Ｂ２１、Ｂ１９ 中均极显著上调表达（Ｐ＜００１）。 综上所述，ＳＮＣＡ 是 ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ的靶基因。 ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ和ＳＮＣＡ 可能与ＭＤ抗性／ 易感性以及ＭＤ肿瘤转化有关。 关键词：　 ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ； ＳＮＣＡ； 靶向关系； 表达分析 中图分类号：　 Ｑ７８６　 　 　 文献标识码：　 Ａ　 　 　 文章编号：　 １０００⁃４４４０（２０１９）０４⁃０８７４⁃０６ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｇｇａ⁃ｍｉＲ⁃７ｂ ａｎｄ ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅＳＮＣＡ ｉｎ ｓｐｌｅｅｎ ｏｆ ｔｗｏ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ｃｈｉｃｋｅｎ １，２ ２ ３ １，２ ＸＩＡＯ Ｃｈｕｎ⁃ｔｉｎｇ ，　 ＬＩＡＮ Ｃｈｕａｎ⁃ｊｉａｎｇ ，　 ＹＩ Ｃｈｅｎｇ ，　 ＣＨＥＮ Ｈｏｎｇ⁃ｙａｎ （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＮｏｒｔｈｅａｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ １５００３０，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｈａｒｂｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌ⁃ ｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ／ ＳｔａｔｅＫｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｈａｒｂｉｎ １５００６９，Ｃｈｉｎａ；３．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ｆ