第六章--荧光分光光度法.pptVIP

第六章 荧光分光光度法 基本要求： 了解荧光光谱法的基本原理和应用特点。了解荧光分光光度计的组成以及特点。掌握荧光光谱法的定量分析方法。了解影响荧光强度的因素。 第一节 概论 一、应用： 1.定量分析 能产生荧光 或能形成荧光配合物的物质。 2.简单定性 回答“是不是”。 第二节 基本原理 一、分子荧光的产生 物质吸收光辐射 价电子从基态跃到激发态，然后再回到基态 释放能量⒈以热能的形式。⒉以光辐射的形式。以光辐射形式释放能量时，发射荧光。这种现象称为光致发光。 最常见的光致发光：荧光和磷光。 两者发光机理不同，寿命不同。荧光寿命10-9～10-6秒，磷光寿命10-3～10秒。 荧光可由激发态的分子产生，也可由激发态的原子产生，本章介绍分子荧光。 由于荧光的产生由价电子引起，所以，荧光光谱属于电子光谱，其波长范围位于：紫外光区和可见光区。 二、激发光谱和发射光谱 ⒈ 激发光谱 固定荧光波长，以激发光波长对荧光强度(F)所作的光谱曲线。 ⒉ 发射光谱 固定激发光波长，以荧光波长对荧光强度F所作的光谱曲线。 三、分子荧光与分子