抗迟缓爱德华菌Edwardsiellatarda单克隆抗体的制备及双抗夹心.pdf

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2016, 32 7 :200-205 抗迟缓爱德华菌（Edwardsiella tarda ）单克隆抗体的制 备及双抗夹心 ELISA 检测方法的建立 杨川  秦艺丹  胡潜  李强 （大连海洋大学 农业部北方海水增养殖重点实验室，大连 116023） 摘 要 ： 以迟缓爱德华菌株2CDM001 为抗原，利用杂交瘤技术制备了迟缓爱德华菌的单抗8D11、8H4、2F4、18C12、 16E2、20D3、19G2、5F7、4E6、7C5、18H9。在特异性方面，单抗8H4 和2F4 特异性较差，与美人鱼弧菌ATCC33539、 鮰爱德 华菌ATCC33202 等参考菌株均出现不同程度的交叉反应，而其余9 株单抗特异性强，与实验中用到的除迟缓爱德华菌外的参考菌 株均不结合 ；但与迟缓爱德华菌分离株的检测结果表明，仅有20D3 和8H4 可与所有分离株结合，其余单抗不能与实验中所有迟 缓爱德华菌发生反应。由于单抗8H4 与美人鱼弧菌ATCC33539 有交叉反应，因此选单抗20D3 和兔源多抗建立迟缓爱德华菌的双 抗夹心ELISA 检测方法，该方法特异性强，灵敏度达到5×107CFU/mL。本研究扩充了迟缓爱德华菌单克隆抗体库，为迟缓爱德华 菌单克隆抗体的进一步应用提供更多参考数据和可选择的材料。 关键词 ： 迟缓爱德华菌 ；单克隆抗体 ；双抗夹心ELISA DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.07.029 ， Production of Monoclonal Antibodies Against Edwardsiella tarda and - Establishment of Double antibody Sandwich ELISA Method YANG Chuan QIN Yi-dan HU Qian LI Qiang （Key Laboratory of Mariculture Stock Enhancement in North China ’s Sea （Ministry of Agriculture ），Dalian Ocean University ， Dalian 116023 ） Abstract: Using Edwardsiella tarda 2CDM001 as antigen and hybridoma technique，we prepared the monoclonal antibodies（mAbs） 8D11，8H4，2F4，18C12，16E2，20D3，19G2，5F7，4E6，7C5 and 18H9 against E. tarda. Among these mAbs，8H4 and 2F4 had the poor specificity，presented varied cross reactions with control strains such as （ATCC33539）and （ATCC33539）.