抑制性消减杂交分离苹果缺铁诱导的相关基因.pdf

园　艺 　学 　报 　2007, 34 ( 3) : 555 - 560 A cta Horticu ltu rae Sin ica 抑制性消减杂交分离苹果缺铁诱导的相关基因 1, 2 1 1 1 1 1 张玉刚 , 许雪峰 , 李天忠 , 王 　忆 , 孔 　瑾 , 韩振海 (1 中国农业大学园艺植物研究所 , 北京 100094; 2 青岛农业大学园艺学院 , 山东青岛 266109) 摘 　要 : 以铁高效基因型植物 ———苹果属小金海棠 (M a lus x iaoj inens is Cheng et J iang) 为材料 , 利用抑 制性消减杂交 ( SSH ) 方法 , 成功构建了小金海棠缺铁条件下的消减 cDNA 文库 。该文库包含 1 152 个克 隆 , 通过 PCR 检测插入片段大小在 300 ～1 000 bp 之间。对构建的消减 cDNA 文库进行差异筛选 , 得到差异 表达片段 ( ESTs) 105个 。GenB ank上 BLA ST结果如下 : 50 个 ESTs与其它物种同源性较高 , 视为已知基 因 , 并根据其功能分为 9 个组 ; 32 个 ESTs在 GenB ank 中无法查到对应的同源序列 , 可能代表了新基因; 另外 23个是与已知 ESTs重复的基因片段 。 关键词 : 苹果 ; 小金海棠 ; 抑制性消减杂交 ; cDNA 文库 ; 差异筛选 中图分类号 : S 661　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2007) Isola tion of Fe D ef ic iencyinduced Genes by Suppression Subtractive Hybr id iza tion in M a lu s x ia oj in en sis 1, 2 1 1 1 1 1 ZHAN G Yugang , XU Xuefeng , L I Tianzhong , WAN G Yi , KON G J in , and HAN Zhenhai (1 Ins titu te f or H orticu ltu ra l P lan ts, Ch ina A g ricu ltu ra l Un ivers ity, B eij ing 100094, Ch ina; 2 H orticu ltu ra l Colleg e, Q ing dao A g ricu ltu ra l Un ivers ity, Q ingdao, S handong 266 109, Ch ina) A b stract: In order to iso late gene s invo lved in Fe nu trition , supp re ssion sub tractive hyb ridization ( SSH ) wa s p erform ed u sing m ixed cDNA s p rep ared from M a lus x iaoj inens is roots treated w ith Fe deficiency a s te ster and treated w ith Fe sufficiency a s drivers. A forward sub tractive cDNA lib rary wa s