斑马鱼受精过程中原核的时空规律.pdf

第24卷第4期 河北大学学报(自然科学版) V01．24No．4 ofHebei ScienceEdition) Jul．2004 2004年7月 Journal University(Natural 斑马鱼受精过程中原核的时空规律 郭明申，王晨阳，康现江，韩力强 (河北大学生命科学学院，河北保定071002) 摘 要：斑马鱼的成熟卵子处于第2次减数分裂中期，精子通过受精孔进入卵内，精子入卵后，卵子被激 min精核开始解凝；受精后8min，精核 活；受精后3min，精核位于卵质膜内侧边缘，处于凝集状态；受精后5 明显解凝，受精卵出现明显的精子星光．同时进入第2次减数分裂后期，之后排出第二极体；受精后10min， 雄原核形成，具有双星光，此时，雄原核已位于胚盘中部；受精后15min雌原核已形成，雌、雄原核向胚盘中 央靠近；受精后20min，雌雄原核开始接触；受精后30min，雌雄原核完全融合成为1个合子核；35min时， min后分裂形成2个子核；50min时分裂为2细胞，60min时分裂为4细胞． 受精卵开始第1次卵裂；45 关键词：斑马鱼；受精；雌原核；雄原核 中图分类号：Q954．44 文献标识码：A 目前，国内外许多学者对硬骨鱼类受精生物学进行了较深入的研究，涉及的内容有：精卵识别bJ，精子 入卵¨。5J，皮质小泡的破裂№。7j，雌雄原核的结合过程¨～8j等方面． Mrio 斑马鱼(Bm如d＆订ioHam)又名蓝条鱼、花条鱼．鲤科．身上有像斑马一样的纵向条纹，所以称其为 斑马鱼，成体长为3～4cm．肉食性，主要以水蚯蚓、红虫为食．孵出后约3个月性成熟，卵生，产卵多、发育 快、体外受精、受精卵经2～3d孵出仔鱼，胚胎透明．它作为一个新崛起的模式动物已成为研究脊椎动物特 别是鱼类发育很好的材料．对斑马鱼的研究主要集中于胚胎发育方面，对受精生物学方面研究较少，笔者对 斑马鱼受精过程中原核的时空规律进行了研究．通过对斑马鱼受精过程中原核的变化进行观察，不仅丰富了 鱼类生殖生物学的内容，同时对鱼类杂交繁殖也具有重要的生物学意义和生产实践意义¨1J． 1 材料与方法 1．1 材料 从保定市市场购得若干条生长3～4个月的斑马鱼，放入水族箱中，保持水温25～26℃．每日用红线虫 喂食2次，养至5个月左右，然后挑选体型较大且腹部鼓胀的雌鱼和体色发黄且游动敏捷的雄鱼，以雌雄2：l 的比例放入水族箱，第2天黎明观察斑马鱼产卵，并收集所产的卵． 1．2 方法 把所收集的卵放入解剖镜下观察，选取微黄色粒状的受精卵，然后分别在受精后1，3，5，8，10min取样， 以后每隔5min分别取样，到60 min结束，每次取卵10个左右．将材料于波恩氏液中固定24h左右，酒精系 列脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续切片厚度为6～8 学显微镜观察并摄影． 收稿日期：2003一08—08 基金项目：河北省自然科学基金资助项目(303118) 作者简介：郭明申(1964一)，男，河北保定人，河北大学高级实验师 万方数据 ·410· 河北大学学报(自然科学版) 2004年 2 结果 2．1 精子入卵 斑马鱼的受精为体外受精，其受精过程是精子穿过卵膜孑L，进入卵内的．一般只有一个精子进入受精孔． 受精后3min，受精卵仍处于第2次减数分裂中期，此时，精子已进入卵质，位于卵质边缘，精子入卵处的卵质 略微突起，精核处于凝集状态(图1a)．受精后5min，细胞质向动物极流动，形成胚盘． 2．2 雄原核的形成 受精后5min，精核开始略微解凝缩，精核发生形变，体积有所膨胀，并伴随出现微弱星光(图1b)．受精 后8min，精核明显解凝，体积更加膨胀，核内一些染色