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组培实验仪器的设备和耗材
一、实验环境
专业的植物组培实验室是植物组织培养成功的关键因素之一。植物组织培养的整个过程都必须要在无菌的环境中进行,从外植体的消毒、修剪、接种到后期的无菌苗培养,都离不开无菌的实验环境,一个专业而且洁净的植物组培实验室是植物组培实验成功不可缺少的条件,它可以很大程度的降低组培操作和无菌苗培养过程中的污染几率。
二、实验仪器设备和耗材
1.超净工作台:是一种提供局部高洁净度工作环境通用性较强的空气净化设备,是植物组织培养中的核心仪器,可以提供的洁净程度可达到百级。没有超净工作台提供的无菌环境,植物组培的成功率几乎为零。在常规的实验室环境内,是无法进行植物组织培养操作的,即使完成实验操作,最后培养的无菌苗也会被外界的微生物污染。川布兰超净工作台具有防紫外线伤害装置,是国家的专利保护产品。此装置能防止学生在操作不当忘记关闭紫外灯进行实验的情况下,免受紫外灯照射造成伤害,是植物组织培养成功的必备“武器”。
2.高压蒸汽灭菌锅:是植物组织培养实验的另一核心仪器,在植物组织培养的过程中进行培养基、接种仪器的灭菌,使其达到无菌的目的。在2012北京川布兰组培大赛中,由于部分学校没有购买高压蒸汽灭菌锅,而是使用普通家用高压锅对培养基进行灭菌,(家用高压锅的灭菌温度未能达到完全杀死细菌的温度),最后实验结果表明,其污染的概率达到了70%以上,致使没能完成本次组培大赛;而大部分使用高压灭菌锅灭菌培养基并结合超净工作台使用的学校,能有效的把污染几率控制在10%以下,有的学校甚至达到零污染,总而言之,超净工作台和高压灭菌锅是植物组织培养成败的决定性仪器,而选择专业的组培必备仪器更有利于实验的开展和成功。
3.微量可调移液器及吸头:量取微量液体的实验工具,用于量取少量和微量的激素母液,调节各种培养基中所需要的激素浓度。微量可调移液器在其他实验中的应用率同样较高,而有些实验要求所用仪器保证无菌,即可以进行高温高压灭菌和紫外线的照射,传统的移液器是无法完成的,而由川布兰的微量可调移液器在设计开发时充分考虑到了这点。
4.光照培养架:无菌苗培养的场所,提供植物生长所需的光照,并能根据实际情况控制光照强度。如果直接将接种好的组培瓶放置于一般环境中,则会由于光照强度不足导致诱导失败。因此,最好选择光照培养架为组培苗提供更适宜生长的条件。
5.光照培养箱:无菌苗培养的场所,在植物培养过程中不但可以提供合适的光照强度,还能控制无菌苗培养的温度。另外光照培养箱还能根据不同植物的生长习性,调节光照周期,适合用于开展课外探究活动,例如,短日照菊花品种通过调节光照时间长短可以控制菊花开花或饲养昆虫、小动物等。光照培养箱比光照培养架功能更加强大,应用面不仅仅局限于植物组织培养的范围内,且管理也更加方便,即使在寒暑期无人值守的情况下,只要事先将各个参数设定好,既无后顾之忧。
6.电磁炉或微波炉:培养基加热溶解工具,小组实验的少量培养基加热可以用烧杯和微波炉加热,大班实验开展用电磁炉进行大量加热更加方便。
7.酒精灯:进行解剖刀、解剖剪、镊子火焰灭菌的工具,建议使用整体不锈钢的酒精灯,有效防止摔坏。
8.解剖剪:修剪外植体的实验工具。
9.解剖刀:切割外植体的实验工具。
10.镊子:夹取外植体进行修剪和接种的工具,无菌操作过程中双手严格禁止接触外植体,必须使用镊子进行操作。
11.组培瓶:无菌苗生长的场所,PC塑料制成,透明度高,可以高温灭菌;透气瓶盖内有细菌过滤棉,有效防止外界空气中的细菌进入组培瓶对培养基造成污染。目前,仍有部分学校使用玻璃三角瓶等仪器盛放培养基,玻璃仪器易碎,且大批量接种搬运不便。许多学校在得知有塑料组培瓶后,皆替代了传统的玻璃培养瓶。
12.玻璃仪器:烧杯、玻璃棒、试剂瓶、培养皿等,常规用于配制和分装试剂药品的玻璃装置。
13.植物组培试剂盒:提供了植物组织培养基的各种营养成分,调节植物生长的常用激素6-BA和NAA,使用时只需把MS培养基干粉加水后加热溶解,添加合适的激素浓度分装灭菌即可。使用试剂盒的优势在于大大减少了植物组织培养的实验准备工作,相对传统的配制培养基方法,称量十几种试剂进行
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