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呼吸速率的测定—广口瓶法 实验目的 呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一,常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。测定呼吸速率的方法虽然很多,但不外乎测定二氧化碳的释放量和氧气的吸收量两类方法。本实验用广口瓶法测定植物的呼吸速率,并比较小麦吸胀的种子与幼苗的呼吸速率。 实验原理 密闭容器中加入一定量碱液(一般用氢氧化钡),并悬挂植物材料,则植物材料呼吸放出的二氧化碳可为容器中氢氧化钡所吸收,然后用草酸滴定剩余的氢氧化钡,从空白和样品二者消耗的草酸溶液之差,可计算出呼吸释放的二氧化碳量,其反应式如下: Ba(OH)2+CO2→BaCO3↓+H2O Ba(OH)2+H2C2O4→BaC2O4↓+2H2O 材料、仪器与试剂 植物材料:吸胀小麦种、芽长0.5cm左右的小麦种子 仪器:广口瓶装置(见图2)、台秤、酸式滴定管、滴定管架一套 试剂:1/44 mol/L草酸溶液:准确称取重结晶H2C2O4 ?2H2O 2.8651g,溶于蒸馏水中,定容至1000ml,每ml相当于1mg CO2。 0.05mol/L 氢氧化钡溶液:Ba(OH)2 8.6g 或Ba(OH)2 ?8H2O 15.78g溶于1000ml蒸馏水中。如有浑浊待溶液澄清后使用。 酚酞指示剂:称取1g酚酞,溶于100ml95%乙醇中贮于滴瓶中。 实验步骤 1.???? 取500ml广口瓶两只,装置如图所示。瓶口加一三孔橡皮塞:一孔插入装有碱石灰的干燥管,以吸收进入瓶内空气中的二氧化碳;一孔插入温度计;第三孔供滴定用,实验时插一小橡皮塞,塞下悬挂一尼龙纱小筐供装植物材料用。 2.???? 空白滴定:拔出两广口瓶的小橡皮塞,向瓶中加入氢氧化钡溶液20ml,再塞进瓶塞。充分摇动广口瓶几分钟,待瓶内二氧化碳全部被吸收后,拔出小橡皮塞,加入三滴酚酞,把酸滴定管插入孔中用草酸溶液进行滴定至红色刚刚消失为止,记下草酸溶液用量(ml),即为空白滴定值。 3.???? 材料滴定值的测定:倒出废液,先用自来水,再用煮沸并冷却过的蒸馏水洗净广口瓶,重加20ml氢氧化钡溶液于两广口瓶中。取吸胀小麦种100粒同时称出重量装入小筐中,迅速挂于橡皮塞下,塞好塞子。另一瓶取100粒芽长0.5cm左右的小麦种子,同时称出重量装入小筐中,操作同前。开始记录时间,其间轻轻摇动数次有利于二氧化碳充分吸收,经30分钟后迅速打开瓶塞取出小筐,立即塞紧。拔出小橡皮塞,加入三滴酚酞,用草酸滴定同前,记录草酸溶液用量,即为材料滴定值。 4.???? 计算呼吸速率: * *
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