气相色谱法GC 现代食品检测技术 教学.pptVIP

§7-1 气相色谱法概述一、色谱法的由来 1906年由俄国植物学家Tswett创立，用来分离植物色素，见图示。 现在：一种重要的分离、分析技术，分离混合物各组分并加以分析。 二、何谓色谱法？目的？ 色谱法是一种分离技术 试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行分配，从而实现混合物分离、分析的一种方法。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 目的：定性分析、定量分析 （4） 检测及记录系统 （5） 温度控制系统 §7-2 气相色谱法理论基础 一、色谱分离过程 2. 色谱峰的正态分布 在气相色谱中，塔板数n是很大的，此时流出曲线可趋近于正态分布曲线，这样流出曲线C与时间t 的关系可由下式表示： 2、柱长及柱内径的选择 增加柱长，有利于组分的分离，但会延长分析时间，柱阻力增加，操作不便。 在达到一定分离度的前提下，尽量选择较短的色谱柱，填充柱常用1-3m。 选择柱长简便的方法是，先选一根极性适宜，任意长度的柱测定分离度，而后确定适宜的柱长。 柱内径大，可允许增大进样量，但显著降低柱的分离效能（分子扩散路径增加）；柱径小，有利于提高柱效，但柱的阻力大，影响分析速度。一般柱内径为3-4mm。 3、担体粒度及填充程度 是影响涡流扩散项的主要因素； 担体粒度要求小而均匀，这样可提高柱效，但粒度过细阻力大，对操作不利，一般60-80目，同时装填要均匀。 4、固定液配比的选择 是指固定液重量与担体重量之比，它是影响传质阻力项的主要因素。要求固定液能均匀覆盖担体表面。一般选择5%-25%。 低配比，液膜薄，传质快，柱效高，分析速度快，但允许的进样量少。 5、进样时间和进样量的选择 进样要快，一般用注射器或气体进样阀进样，一秒钟内可完成。如进样时间过长，造成样品原始宽度变大，峰形变宽甚至变形。 进样量应控制在使峰面积或峰高与进样量成正比的范围内。一般液体试样0.1-5.0μL，气体试样0.1-10mL。少，检测不出来，多，峰重叠。 6、气化温度的选择 以试样能迅速气化而不分解为准，适当提高气化温度对分离及定量有利，一般较柱温高（30-70℃），与试样的平均沸点相近。 7、柱温的选择 原则： ①低于固定液的最高使用温度。否则，柱寿命缩短，污染检测器，重现性差。 ②在能保证R的前提下，尽量使用低柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。通常柱温应比试样中各组分的平均沸点低20-30℃。具体通过实践选择。对于气体、气态烃等低沸点混合物，柱温往往选在其沸点以上，以便于室温或50℃以下分析。 ③宽沸程样品应采用程序升温。 程序升温好处： 改善分离效果 缩短分析周期 改善峰形 便于检测 §7-4 气相色谱检测器 一、检测器类型 浓度型检测器： 测量的是载气中组分浓度瞬间的变化，检测信号值与组分的浓度成正比。热导检测器 质量型检测器： 测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测信号值与单位时间内进入检测器组分的质量成正比。FID 广普型检测器： 对所有物质有响应。热导检测器 专属型检测器： 对特定物质有高灵敏响应。电子俘获检测器 二、热导检测器（thermal conductivity detector,TCD） 1.热导检测器的结构 池体: 一般用不锈钢制成 热敏元件: 电阻率高、电阻温度系数大、且价廉易加工的钨丝制成。 惠斯顿电桥 测量臂——接在色谱柱后，通样品气体+载气，电阻为R1 参比臂——接在色谱柱前只通载气，电阻R2 两个等阻值电阻R3 = R4 5. 塔板理论的特点 当柱长度一定时，n 越大( H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。 不同物质在同一柱上的 K 不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。 柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的 K 相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。 塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效（板高）的因素及提高柱效的途径。 成功之处： 解释了色谱流出曲线的形状和峰高与进样量的关系等； 评价柱效（n） 四、速率理论——影响柱效的因素 1.速率方程（也称范?弟姆特Van Deemter方程式） 1956年荷兰学者范?弟姆特等人从传质过程考虑，提出了Van Deemter方程式，概括联系了影响塔板高度的动力学因素： H：理论塔板高度，u：流动相流速（cm/s） 减小A、B、C三项可提高柱效 A、B、C三项各与哪些因素有关？