课题_土壤中分解尿素细菌分离和计数.pptVIP

9.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方 (5)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能分解 尿素，可在培养基中加入______指示剂，尿素 被分解后指示剂变______色。 酚红 红 10、实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是 ( ) A链霉素能阻止结核菌的生长 B链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效 C链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D链霉素可以用于治疗伤寒病人 D (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。 (4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。 (5)如果提高培养基中Nacl的浓度，可以用于筛选耐________细菌，这种培养基被称为________。 恒温培养箱 无菌水 多 大 盐或NaCl 选择培养基 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 二 实验设计 3. 实验过程： （2）制备培养基 制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和15个选择培养基。 注：每个稀释度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。 稀释倍数为103~107。　　 二 实验设计 3. 实验过程： （3）样品的稀释 ◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ P24旁栏思考 原因：土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的。例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。 结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。 分离不同的微生物采用不同的稀释度 稀释倍数 目的 细菌 104、105、106 保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板 放线菌 103、104、105 真菌 102、103、104 原因：不同微生物在土壤中含量不同 (4)取样涂布 例:某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得 平板上菌落数的平均数为234，那么每克样 品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液 的体积为0.1ml） ( ) A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4 B 计算公式： 每克样品中的菌株数 =（C÷V）×M 二 实验设计 2. 实验流程： （5）微生物的培养与观察 ①培养皿编号：104、105、106各编号三个 培养皿。 ②每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 15ml。 ③用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤 稀释液各0. 1ml，转动培养皿，使土壤稀释 液与培养基混合均匀。 ④冷却倒置放入30~37摄氏度的恒温培养箱中 培养。观察纪录。 在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。 培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。 注意事项 ◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。 微生物的培养与观察 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。 (6)细菌的计数 [一]无菌操作 　1.取土用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 　2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。 　3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。 操作提示 [二]做好标记 　　注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。 [三]规划时间 1.对照的培养皿在培养过程中无菌落生长,说明培养基,没有被杂菌污染;牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显大于选择培养基的数目,说明培养基已筛选出一些菌落. 四、 结果分析与评价 2.如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的