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第12章 核酸分解及核苷酸代谢 Chapter 12 Nucleic Acid Catabolism Nucleotides Metabolism 第12章 核酸分解及核苷酸代谢 Chapter 12 Nucleic Acid Catabolism Nucleotides Metabolism Ⅰ.核酸的分解（水解） 无嘌呤酸 碱基与戊糖的N-糖苷键 磷酸之间的3,5 -磷酸二酯键 1.酸水解 最不稳定顺序 DNA嘌呤糖苷键﹤嘧啶糖苷键﹤磷酸酯键 DNA：pH 1.6于37℃透析即可完全除去嘌呤； pH 2.8于100℃加热1 h，也可除去嘌呤 化学键 2.碱水解 RNA二酯键﹤ DNA二酯键﹤糖苷键 最不稳定顺序 2-核苷酸和3-核苷酸 少量核苷 2, 5-和3, 5-核苷二磷酸 DNA 水解产物 RNA 碱稳定，稀碱只变性，不水解！ 无2-OH，故不形成2, 3-环核苷酸中间物！ l mol/L NaOH中100℃4 h，得寡聚脱氧核苷酸！ 3.酶水解 分解部位：小肠、十二指肠 吸收部位：小肠粘膜 核酸酶 部位 磷酸二酯酶 非特异性水解磷酸二酯键，无碱基专一性 专一水解核酸的酶，有碱基专一性。 ⑴核酸外切酶exonuclease 从核酸末端开始逐个水解出核苷酸的核酸水解酶。 概念 5端开始，产生3-核苷酸 3端开始，产生5-核苷酸 蛇毒磷酸二酯酶 牛脾磷酸二酯酶 ⑵核酸内切酶endonuclease 从核酸内部开始，有一定专一性切点的核酸水解酶。 ①核糖核酸酶类 A.牛胰核糖核酸酶（RNaseⅠ，EC 2.7.7.16） 例题 牛胰 概念 提取 产物 性质 最适pH为7.0~8.2，耐热，可人工合成。 3-嘧啶核苷酸； 或3-嘧啶核苷酸结尾的寡核苷酸。 B.核糖核酸酶T1（ribonuclease T1，EC 3.1.4.8） Ap残基 tRNA可形成3-腺苷酸结尾的寡核苷酸 性质 产物 切点 耐热，耐酸；专一性较高 C.核糖核酸酶T2（RNase T2，EC 2.7.7.17) 3-鸟苷酸为末端的寡核苷酸 或3-鸟苷酸 ②脱氧核糖核酸酶类 A.牛胰脱氧核糖核酸酶 B.牛脾脱氧核糖核酸酶 最适pH 4~5， 0.3 mol/L Na+激活，Mg2+抑制！ 3-磷酸末端的寡聚核苷酸 平均长度为6个核苷酸。 产物 名称 名称 产物 底物 DNaseⅠ，EC3.1.4.5 双链或单链DNA 5-磷酸结的寡聚核苷酸 平均长度4个核苷酸。 条件 DNaseⅡ，EC 3.1.4.6 C.链球菌脱氧核糖核酸酶 特征 条件 最适pH=7。 5-磷酸为末端的碎片 长度不定 RNase：酶稳定、耐高温 DNase：种类多、工具酶 产物 ⑶限制性内切酶restriction endonuclease 细菌中存在的降解外源DNA的核酸水解酶。 适应 概念 有4~6对碱基序列的专一性， 中心点互补对称 大多数产生粘末端。 可能是细菌的免疫防御， 抵抗外来分子侵袭， 相当于免疫细胞。 特点 限制性内切酶是分子生物学研究的重要工具酶 Eco RⅠ E： 大肠杆菌（Escherichia coli）的属名 co： 种名的头两个字母 R： 菌株、变种、品种 Ⅰ：酶类别 是否斜体？ 命名 属名＋种名＋株名+类别 Ⅰ类：内切、修饰，识别与切割位点不一致 Ⅱ类：识别与切割位点统一 Ⅲ类：切割方式基本同Ⅱ类 Ⅱ.核苷酸的降解 1.核苷酸的水解 核苷酸+H2O→核苷+磷酸 名称：总称磷酸单酯酶， 2，3，5-Pi 存在：广泛存在 核苷酸酶：水解3，5-Pi 的磷酸单酯酶！ 核苷磷酸化酶 核苷+磷酸←→碱基+戊糖-1-磷酸 存在广泛，反应可逆。 酶 核苷+H2O→碱基+戊糖 名称：核苷酶或核苷水解酶 作用：植物和微生物，只水解核糖核苷 酶 2.嘌呤的分解 嘌呤分解产物 人类、灵长类、爬行类、鸟类 氨 尿素 尿酸 微生物 植物 鱼类、两栖类、人类（少） 鱼类、两栖动物、海洋无脊椎动物 大量存在代谢中产物 如尿囊素和尿囊酸等 氨、二氧化碳、有机酸（甲酸、乙酸、乳酸等） 尿酸生成 人体嘌呤代谢 主要肝脏、小肠、肾脏 核酸大量分解（白血病、恶性肿瘤等）或食入高嘌呤食物，血中尿酸＞0.48mmol/L 关节炎、尿路结石及肾疾（痛风） 尿酸成盐结晶，沉积于关节、软组织、软骨及肾等 别嘌呤醇，结构似次黄嘌呤 抑制黄嘌呤氧化酶！ 症状 治疗 部位 异常 原因 3.嘧啶的分解 Ⅲ.核苷酸的合成 1.嘌呤核糖核苷酸的合成 N N C 1 3 4 5 6 7 8 N N 9 2 C C C C N1 ： 天冬氨酸 C2、C8 ：