水酶法提取菜籽油的研究-.docVIP

　　收稿日期:2005-06-08;修回日期:2005-08-11 作者简介:李桂英(1975-,女,在读硕士;主要从事水酶法提取菜籽油与菜籽蛋白的研究。 文章编号:1003-7969(200510-0033-03　　　　中图分类号:TS22414　　　　文献标识码:A 水酶法提取菜籽油的研究 李桂英,袁永俊 (西华大学生物工程学院,610039成都市 　　摘要:采用对油菜籽细胞的物理破碎和酶降解相结合的方法,建立一种菜籽油提取新工艺。对油菜籽原材料的预处理、酶解方法及酶解动力学进行了研究,探索了中性蛋白酶在油菜籽制油工艺中的作用及其影响因素,得出最佳酶解条件为:温度为50℃左右,pH 为610~615(从出油率来考虑,料水比为1∶4~1∶5,最佳用酶量为200U/g (酶单位/油料左右,油菜籽的破碎度最好在160~200目。为水酶法提取菜籽油优化工艺提供了基础资料。 关键词:水酶法;中性蛋白酶;菜籽油 　　传统的制油工艺大多采用机械方法来破坏细胞壁,从而使油脂能顺利地被压榨出来,但是制得的油色泽深,油质较差,出油率不高。采用水酶法制油可增加设备容量、脱除部分毒素、油清澈透明,还可大大提高出油率。 在水酶法制油研究中,有许多学者采用纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶来降解植物细胞壁,使油料细胞内有效成分如蛋白质、油脂释出。但由于纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶现有的市场价格高,从成本因素考虑,可采用机械破碎与湿热方法(90℃下加热2h 相结合来破坏植物细胞壁,再利用蛋白酶降解蛋白质以释放其所吸附的油脂,为此本文以油菜籽为样品研究水相酶解菜籽蛋白对出油率的影响,为水酶法制备菜籽油工艺的优化提供基础。1　材料与方法111　实验材料 油菜籽:市售,水分含量为8167%,粗脂肪为39145%,粗蛋白质为24185%。As 1l398中性蛋白 酶:北京酶制剂厂生产。112　实验方法 11211　原料预处理方法对出油的影响　分别称取25g 油菜籽粉,加入125m L 蒸馏水(1∶5料水比,在 不同加热时间、加热温度、捣碎时间下加入1m L 中性蛋白酶液,于45℃恒温水浴中酶解4h ,煮沸灭酶10min ,用离心机在3500r/min 下离心10min ,取油 水层,萃取,烘干,称重。 11212　不同酶解方法对出油的影响　称取25g 油 菜籽粉,加入125m L 水,于90℃下加热2h ,取出捣碎15min ,用细纱布4层过滤,除去皮壳,得到乳液。然后分别按以下3种方法酶解: (1在乳液中加入10m L 酶液,于45℃恒温水 浴中酶解4h ,煮沸灭酶10min ,在3500r/min 下离心10min ,取液相层,萃取,分液,烘干,称取清油净重。 (2用011m ol/L 盐酸调节乳液pH 为416(由 于菜籽蛋白大多数是球蛋白与清蛋白,其等电点在4~6,离心分离后,保留液相,固相加入100m L 水, 调节固液比(1∶5,加入10m L 酶液,于45℃恒温水浴中酶解4h ,煮沸灭酶10min ,在3500r/min 下离心10min ,取液相层,合并两次所得液相层,萃取,分 液,烘干,称取清油净重。 (3于乳液中加入10m L 酶液,保温酶解4h ,调 节pH 到416,离心分离后,保留液相,将固相加入100m L 水,调节pH 到710,加入10m L 酶液进行二 次酶解,4h 后煮沸灭酶10min ,在3500r/min 下离心10min ,取液相层,合并两次所得液相层,萃取,分液,烘干,称取清油净重。 11213　酶解动力学研究　分别称取25g 油菜籽粉, 按11212(1操作,考察在不同温度、pH 、底物浓度、酶用量、破碎度对出油率及水解度的影响。11214　分析方法　固体样品中油脂含量测定:索氏 抽提法;液体样本品油脂含量测定:W erner -Schmidt ;蛋白质含量的测定:凯氏定氮法,参照G B 5497-1985;氨基氮的测定:甲醛滴定法;水解度的测定:水 解度(DH =(水解后生成的-NH 2基的量/样品总含N 量×100%;水解后生成的NH 2基的量由甲醛 3 32005年第30卷第10期　　　　　　　　　　　　　中　国　油　脂 滴定法测得,样品总含氮量由凯氏定氮法测定;蛋白酶活力测定:F olin 酚法,参照G B 547-1980;水分测定:常压烘干法,参照G B 5495-1985。2　结果与讨论 211　原料预处理方法对出油的影响 21111　不同加热时间对出油的影响　结果见表1。 表1　不同加热时间对出油的影响 加热时间(h油(g 211257 31875 516401 517120 　　由表1可知,加热时间为2h 时,出油最高。21112　不同加热温度对出油的影响　结果见表2。 表2　不同