miR-6803和PPP6R1在食管鳞状细胞癌组织和细胞中的表达.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 ·972 · Chin J Cancer Biother, Sep. 2017, Vol. 24, No. 9 DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2017.09.008 ∙临床研究∙ miR-6803 和PPP 6R1 在食管鳞状细胞癌组织和细胞中的表达及其甲基 化状态与患者临床病例特征的关系 沈素朋,徐凤楼,刘江惠,卢帆,梁佳,郭炜,董稚明（河北医科大学第四医院 河北省肿瘤研究所，河北 石家庄 050011） [摘 要] 目的：探讨微小RNA-6803（miR-6803）及其宿主基因蛋白磷酸酶6 调节亚单位1（protein phosphatase 6 regulation sub- unit 1, PPP 6R1）在食管鳞状细胞癌（ESCC ）中的表达和PPP 6R1 基因启动子区甲基化状态及其在ESCC 发生及发展中的作用。 方法：采用2013 年至2014 年间河北医科大学第四医院生物标本库的72 例ESCC 手术患者癌组织及对应的癌旁组织标本，用实 时荧光定量PCR 法检测miR-6803 和PPP 6R1 在ESCC 组织及其癌旁组织和DNA 甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2 ’-脱氧胞苷（5- Aza-dC ）处理前后的ESCC 细胞株TE 1、TE 13、Eca 109、T.TN 、Kyse 170 中的表达水平。用甲基化特异性PCR （MSP ）法检测ESCC 细胞系和组织及其癌旁组织中PPP 6R1 的甲基化状态，分析其与患者临床病理特征的关系。结果：ESCC 组织中miR-6803 和 PPP 6R1 的表达水平显著低于癌旁组织（0.318±0.156，0.408±0.177 vs 1.000±0.001 ，均P0.05），miR-6803 表达水平与淋巴结转移、 组织分化程度及TNM 分期密切相关(均P0.05) ；PPP 6R1 表达水平与TNM 分期和组织学分化程度密切相关（均P ＜0.05）。ESCC 组织中miR-6803 和PPP 6R1 基因的表达具有显著相关性（P0.05）。ESCC 组织中PPP 6R1 的启动子区甲基化率显著高于癌旁组 织（56.94% vs 36.11% ，P ＜0.05），并与TNM 分期和组织学分化程度密切相关（均P ＜0.05）,miR-6803 和PPP 6R1 基因的低表达与 PPP 6R1 启动子区甲基化明显相关（P ＜0.05）。经5-Aza-dC 处理后，5 种ESCC 细胞中miR-6803 和PPP 6R1 的表达均升高，并且 TE 1、TE 13、Kyse 170细胞中PPP 6R1 基因甲基化程度降低，非甲基化程度增加，其余2 种细胞中PPP 6R1 基因均表现为非甲基化状 态。结论：miR-6803 及其宿主基因PPP 6R1 的低表达可能与ESCC 的发生发展密切相关，其启动子区甲基化可能是miR-6803 和 PPP 6R1 表达沉默的机制之一。 [关键词] 食管鳞状细胞癌；微小RNA-6803;蛋白磷酸酶6 调节亚单位1（PPP 6R1）基因；甲基化 [中图分类号] R730.54; R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2017 ）09-0972-007 Expression and methylation status of miRNA- 6803 and PPP 6R1 in esophageal squamous cell carcinoma and their relationship with clinical characteristics of ESCC patients SHEN Supeng, XU Fenglou, LIU Jianghui, LU Fan, LIANG Jia, GUO Wei, DONG Zhiming (Cancer Institute of Hebei Province, the Fourth Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050011, Hebei, Ch