miR-135a通过下调SOX2Hep-2细胞的恶性生物学行为和.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 Chin J Cancer Biother, Sep. 2019, Vol. 26, No. 9 ·955 · DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2019.09.004 ∙基础研究∙ miR-135a 通过下调SOX2 抑制喉癌Hep-2 细胞的恶性生物学行为和 增强对奥沙利铂的敏感性 1 1 1 1 1,2 刘扬帆 ，屈中玉 ，王文亷 ，孙星 ，蔡政 （1. 郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院肿瘤一科，河南南阳 473009; 2. 云南省中医医院肿瘤科，云南昆明 650021） [摘 要] 目的：探讨敲降miR- 135a 对人喉癌上皮Hep-2 细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法：收集2018 年1月至2018 年6 月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR 检 测喉癌组织和Hep-2 细胞中miR- 135a 的表达水平。miR- 135 inhibitor 转染喉癌Hep-2 细胞后，采用CCK-8 检测Hep-2 细胞活性， 集落形成实验检测Hep-2 细胞集落形成能力，Transwell 实验检测Hep-2 细胞的侵袭及迁移能力，WB 实验检测Hep-2 细胞中SOX2 蛋白的表达水平。0.5、1.0 、1.5、2.0 µmol/L 的奥沙利铂处理已转染miR- 135 inhibitor 的Hep-2 细胞，CCK-8 实验检测Hep-2 细胞的 增殖活性，Annexin-V-FITC/PI 染色流式细胞术检测Hep-2 细胞的凋亡率。采用miR- 135a inhibitor 质粒、对照pcDNA 空载体 （SOX2-Con）质粒、pcDNA-SOX2 （SOX2-OE）质粒共转染Hep-2 细胞，构建miR- 135a inhibitor+SOX2-Con 组和miR- 135a inhibi- tor+SOX2-OE 组，检测此2 组细胞的增殖活性、集落形成能力、侵袭及迁移能力。结果：与癌旁组织比较，喉癌组织中miR- 135a 表达水平显著升高（P0.01）；与正常NHP 细胞比较，miR- 135a 在Hep-2 细胞中表达水平明显上调（P0.01）；转染miR- 135a inhibi- tor 导致Hep-2 细胞中miR- 135a 表达水平明显降低（P0.01）。敲降miR- 135a 明显降低Hep-2 细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移、 侵袭和SOX2 表达（均P0.01）；明显增强细胞对奥沙利铂敏感性（P0.01）；与miR- 135a inhibitor+SOX2-Con 组比较，miR- 135a inhibitor+SOX2-OE 组的Hep-2 细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移与侵袭能力均明显增加（均P0.01）；同时，用不同浓度的奥沙 利铂处理此2 组细胞，相对于miR- 135a inhibitor+SOX2-Con 组，miR- 135a inhibitor+SOX2-OE 组的Hep-2 细胞存活率显著升高（P 0.01）。结论：敲降miR- 135a 可能通过下调转录因子SOX2 的表达抑制Hep-2 细胞的恶性生物学行为，并增强其对奥沙利铂的敏 感性。 [关键词] 喉癌；Hep-2 细胞; miR-135a; SOX2; 奥沙利铂 [中图分类号] R392.12；R730.5 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2019 ）09-0955-07 miR-135a knockdown inhibits the malignant biological behaviors and promotes oxaliplatin-sensitivity of human laryngeal carcinoma Hep-2 cells by down-regula- tion of SOX2 1 1 1 1 1,2 LIU Yangfan , QU Zhongyu