分光光度技术及蛋白含量测定.pptVIP

实验一 分光光度技术及蛋白含量测定 理论 掌握分光光度技术的基本原理 了解分光光度计的基本构造 实验 利用分光光度计进行蛋白质定量测定 1.双缩脲法测定蛋白质含量 2.考马斯亮兰结合法测定蛋白质含量 3.紫外分光光度法测定蛋白质含量 分光光度技术（Spectrophotography） 一、基本定义 利用物质特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的一项技术 。 应用：定性、定量 优点：灵敏度高 精确度高 操作简便、快速 二、工作原理 1.物质对光线有选择性吸收作用。 2.每种物质都具有其特征性的吸收光谱。 3.在一定条件下，物质对光的吸收程度与该物质 的浓度成正比。 如何定性？ — 利用吸收光谱鉴定化合物 利用分光光度计绘制吸收光谱曲线 用各种不同的单色光分别通过某一溶液，测定此溶液对每一种单色光的吸收度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制吸光度-波长曲线，即吸收光谱曲线。 每种物质有其特征性的吸收光谱 如何定量？ — Lamb