离心沉降式液基薄层制片技术在非妇科细胞学的改良应用.docVIP

２０１ １年全国病理技术新进展研讨会论文汇编 ４３．离心沉降式液基薄层制片技术在非妇科细胞学的改良应用 郝志红 航天中心医院病理科 １０００３９ 液基薄层细胞制片是指薄层制片自动装置制各细胞学涂片的技术，近年来不仅应用于妇科宫颈细胞学的癌前晒查，而且广泛应用于非妇科的细胞学检测，但由于其原理通过细胞密度仪测定样本浓度，由机内微电脑控制调整取样量制片，制片面积小、细胞数量较少，存在一定的局限性，容易出现漏诊、误诊现象，我科通过对离心沉降式液基薄层技术的改进，发现其各方面性能明显优于改进以前，更优于传统手工制片，涂片质量和细胞学诊断的阳性率得到显著提高。１材料和方法１．１材料 ２０１０年１月一２０１０年６月临床送检标本，胸腹水３４例，痰２１例，尿３７例，脑脊液６例，支气管灌洗液３例。染液购自北京化学试剂公司。１．２仪器 赛涂液基薄层制片系统由震荡仪，细胞密度仪，离心制片机组成。１．３方法 （１）胸腹水标本均混匀后，取下层液体分装２个５０ｍｌ离心管中，２０００转／分，离心１０ ｍｉｎ。 （２）用棉签挑取灰白色带血丝样病变痰标本，于清洗瓶中震荡２０分钟，于２个５０ｍｌ离心管中，２０００转／分，离心１０ ｍｉｎ后分别用液基薄层细胞学技术和液基改良细胞学技术制备。１．３．１液基薄片技术 （１）体液标本制片：倒掉上清液，霉鼙诩倭恳禾辶魅牍艿祝巡Ｆ旁谥Ъ苌希沧昂孟赴兀尤耄欤恚煺掣郊粒们雇肺±胄墓艿撞康某恋砦铮ū芸赴驼骋海┘尤氡４嬉褐校驯４嬉浩糠湃朊芏纫牵菝芏鹊燃段∷枰禾澹尤胂赴刂校湃氡〔憷胄幕校伲玻埃埃埃郑胄模保胺种樱锨逡旱沟簦〕霾Ｆ稍锖螅耄梗担ゾ凭潭ǎ旧阉该鳎馄?（２）痰液标本：倒掉上清液，用枪头吸取离心管底部的沉淀物（避开血细胞和粘液）加入保存液中，放用力混匀几分钟，随后同体液标本制片方法相同。１．３．２液基薄片技术改良法 （１）体液标本体液标本制片：倒掉上清液，让管壁极少量液体流入管底，把玻片放在支架上，安装好细胞池，加入ｌｍｌ粘附剂，用枪头吸取离心管底部的沉淀物（避开血细胞和粘液）加入保存液中，把保存液瓶放入密度仪，根据密度测量吸取所需液体的５倍的量，加入细胞池中，放入薄层离心机中，转速２０００／分，离心ｌＯ分钟，将上清液倒掉，取出玻片，此时玻片上细胞成分很多也厚，取一张干净玻片与载玻片的角度为１０．２０度左右，进行推拉推成一张均匀、平整的薄涂片，面积可占整张玻片的三分之二，晾干后，入９５％酒精固定，染色，脱水，透明，封片。 （２）痰液标本：同上取密度仪所侧数量的５倍，放入薄层离心机中离心制片，后用推拉法制成一张薄厚均匀的涂片，干燥后，入９５％酒精固定，染色，脱水，透明，封片。２结果２．１两种涂片细胞形态特征对比，无明显差别，形态结构清晰，成单层排列，制片背景干净，缺少红细胞、细胞碎片，呈淡红色粉染区。恶性细胞中细胞大小不一，浓染，细胞核形态多８３ ２０１ １年全国病理技术新进展研讨会论文汇编样，核膜厚，染色质粗，呈粗颗粒团块状，见明显核仁。２．２细胞数量有显著差别：液基薄层技术，细胞大部分分布均匀，成单层排列，细胞散在，但细胞片子范围较小，有时片子较厚，有时片子上有问题的细胞稀少，难以提供准确的诊断。而液基薄层改良技术制片，玻片面积增大了５倍左右，细胞含量也多了５倍左右，细胞单层排列，形态结构清晰完整，有利于肿瘤的早期诊断。 三组制丘厦量怼腿 组别 改良液基组 拯准这基组 壬王制丘组 细胞范围 面积大 五分之一大小 面积大 细胞数量 多且集中 中等且少 少且分散 细胞分布 薄层均匀 薄层均匀 堆积重叠 背景着色 干净或粉染 干净或厚重 景模糊不清 细胞鎏色 援：塍渲哳 拯：腿渣哳 槿物筮遗３结论 液基薄层技术改良技术在非妇科标本（尤其是胸腹水，痰标本）的应用上，最为明显，其检出阳性率不仅高于传统手工涂片，比普通液基技术有显著提高，且由于细胞涂片面积大，细胞数量多，诊断更为明确可靠，为临床细胞学诊断提供了有利保障。４讨论 以往的脱落细胞学检测都是传统手工涂片，但由于人员经验、个人手法的局限性，容易出现涂片厚薄不均，背景模糊不清，形态变异等假阴性或假阳性结果。而液基细胞制片技术是细胞学新技术的方法之一，其率先被应用于妇科细胞学检查，国内从２００１年开始作液基细胞学筛查宫颈癌的研究，很快就应用于非妇科标本的检测，使该项技术得到迅速发展，被称之为一场细胞学制片技术的革命，它从根本上解决了常规脱落细胞制片假阴性率高 （１５％－２０％）、丢失细胞率高（８０％）和涂片质量差等技术难题，使细胞学的阳性检出率大大提高，为脱落细胞学肿瘤的早期诊断，作出了重大贡献，但是它也有一定的不足，我科自开展非妇科液基薄层改良制片以来体会如下：ｌ液基薄层制片：面积范围小，细胞数量少，每张液基涂