低温苯胺降解菌固定化菌丝球方法与特性.docVIP

低温苯胺降解菌固定化菌丝球方法与特性 第34卷第6期 2008年6月 北京工业大学 JOURNAL0FBEIJINGUNIVERSITYOFTECHNOL0GY V01.34NO.6 Jun.2008 低温苯胺降解菌固定化菌丝球方法与特性 山丹,马放,张斯,王晨,韩瑜 (城市水资源与环境国家重点实验室哈尔滨工业大学,哈尔滨150090) 摘要:为了提高低温条件下含苯胺废水的生物处理效率,采用变温驯化法从活性污泥中分离出低温(7℃)苯 胺降解菌JH一9,研究了其降解特性及生物质载体固定化方法.结果表明,JH一9属于乙酸钙不动杆菌属,能以苯 胺为唯一碳源和氮源,可耐受苯胺质量浓度1000mg/L以上,低温(7℃)下,培养52h对初始质量浓度为150 mg/L的苯胺去除率可达100%.以黑曲霉Y3作为生物质载体,采用同时接种霉菌和JH一9细菌的培养固定化 方法比先后接种霉菌和JH_9细菌的培养固定化方法获得混合菌丝球的培养时间短,且在相同时间内可固定的 细菌量大.混合菌丝球的直径,质量和体积均比空白霉菌菌丝球的大.混合菌丝球对含苯胺废水表现出了较好 的降解效能,在15℃下低温培养66h即可将初始质量浓度为150mg/L的苯胺完全降解.固定化后的功能菌(JH 一 9细菌)仍然保持了原有的活性.由此,本研究提出了同时培养法.此方法将会有效解决传统载体传质效率低, 固定生物量低,成本高等问题,具有广阔的应用前景和工程推广价值. 关键词:低温;苯胺;生物降解;菌丝球;固定化 中图分类号:x172文献标识码:A文章编号:0254—0037(2008)06—0636—06 苯胺(Aniline)在杀虫剂,染料j,橡胶,塑料和药物等的合成中大量使用.近年来,越来越多的苯胺 废水排放到土壤和自然水体中,因其严重污染环境并且具有致畸,致癌,致突变效应而受到人们的广泛关 注j.寒冷地区冬季的平均气温在一20℃～一30℃,污水厂水温通常只有10℃左右,低温会导致活性污 泥严重失活,流失现象严重,导致传统的生物处理系统很难在低温下有效去除苯胺,微生物固定化对解决 此问题较为有效[4-5].传统的固定化技术有很多不足,如微生物与载体的结合不够牢固,载体制备复杂,载 体不能再生,成本较高等.这一系列问题为固定化微生物技术在废水处理中的应用造成了障碍J.目 前,国内外很多学者在研究苯胺的微生物降解_9J,也有很多学者利用菌丝球的吸附能力处理废水中的污 染物[1o-15],但是,将具有污染物降解能力的工程菌固定到菌丝球载体上在国内外未见报道.本研究采用 同时培养法将苯胺降解菌JH一9固定到菌球上制成混合菌丝球,并考察了混合菌丝球的一些基本特性及 其对苯胺的去除效果. 1材料和方法 1.1实验仪器 本试验的主要设备:8037一SGS超型全自动压力蒸汽灭菌器,ZHWY-2112B型双层全温度恒温振荡 器,紫外分光光度仪(UNICAMHE10s),CX31型显微镜,电子天平(ALC一210.4),显微数码成像系统. 1.2菌种来源及培养 取某化工厂污水处理厂曝气池活性污泥样品,进行5个周期(7d为1个周期)的变温培养驯化(驯化 过程中培养温度在5℃～10℃间变化),基质质量浓度分别为200,400,600,1000和1500mg/L.实验菌 收稿日期:2007—06—30. 基金项目:黑龙江省重大课题攻关项目(GB05C202一o5);国家973项目(2004CB185050);黑龙江省杰出青年科学基金 (JC200601). 作者简介:山~J-(1980一),女,辽宁大连人,博士生;马;~(1963一),男,辽宁沈阳人,教授,博士生导师. 第6期山丹等:低温苯胺降解菌固定化菌丝球方法与特性637 株JH一9(如图1所示)为分离菌株在低温条件下降解 苯胺能力最强的一株,它能以苯胺为唯一碳源和氮 源,可耐受苯胺质量浓度为1000mg/L以上.经 MIDISherlock脂肪酸鉴定系统和16SrDNA鉴定. 确定该菌属于乙酸钙不动杆菌属_1.挑取2环保存 在固体斜面培养基上的菌种,接种于盛有100mL初 始质量浓度为150mg/L以苯胺为唯一碳源和氮源的 盐溶液培养基(MSA)的250mL三角瓶中,置180r/ min,7℃恒温震荡培养箱培养(MSA由0.3g/L的 1010 0 图1菌株JH一9的原子力显微镜照片 Fig.1AFMphotographofstrainJH9 FeSO4,0.038g/L的CtlSO4?5H20,0.115g/L的ZnSO4,0.169g/L的MnSO4,0.116g/L的H3Bo3, 0.024g/L的CoC12?6H2O,0.017g/L的Na2MoO4?2H2O,1g/L的KH2PO4,1g/I的K2HP()4组成,苯胺 的量按需加入