实验五肠道杆菌.PDFVIP

实验五 肠道杆菌 掌握肠道病原菌的分离、鉴定的主要步骤以及肥达试验。 熟悉主要肠道杆菌（大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙 门菌及变形杆菌）的形态、培养和生化反应等。 示教： • 主要肠道杆菌：大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及变形杆菌的 形态、染色性,培养特性和生化反应 录像：无芽孢厌氧菌 操作： • 药敏平板结果和甘露醇发酵管结果观察 • 肥达反应 • 粪便肠道致病菌的分离和鉴定——接种双糖管 肥达试验 伤寒沙 •菌体O抗原 作半定量凝集试验 ，测 门菌 定受检血清中有无相应 抗体及其效价高低 伤寒沙 •鞭毛H抗原 门菌 受检血清 甲型副 伤寒沙 •鞭毛H抗原 门菌 用途：辅助临床 肖氏沙 •鞭毛H抗原 诊断肠热症 门菌 微量板 1 2 3 4 5 6 7 8 伤寒O 0.2 ml 0.2 ml 伤寒H 0.2 ml 0.2 ml 副甲H 0.2 ml 0.2 ml 副乙H 0.2 ml 0.2 ml 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 生理盐水 Ag加样方向 1.稀释Ab 病人1：10血清 第一列每孔 0.2 ml 第二列每孔 0.2 ml x4 0.8ml x4 +生理盐水 0.8ml 再加入生理盐水 再加入生理盐水0.8ml 混匀 0.8ml 每列依次对倍稀释至第七孔 2.加Ag：加样方向 每种抗原一行，8→1列每孔一枪0.2ml 3.45℃孵育30分钟 4.结果观察 肠道杆菌的分类 大肠埃希菌 埃希菌属 志贺菌属 福氏志贺菌 E.coli Escherichia Shigella S.flexneri 肠道杆菌 伤寒沙门菌 奇异变形杆菌 变形杆菌属 沙门菌属 S. Typhi P. mirabilis Proteus