水产养殖论文(水产养殖业论文)二溴海因和碳水化合物水平对凡纳滨对虾生长和免疫的影响.docVIP

凡纳滨对虾生长和免疫论文：二溴海因和碳水化合物水平对凡纳滨对虾生长和免疫的影响 摘要:研究了低盐度条件下,二溴海因和碳水化合物水平对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生长和免疫的影响,共3个实验。实验1研究了二溴海因对凡纳滨对虾存活的影响,发现在0.2、5和20三个盐度水平,随着二溴海因浓度的升高,凡纳滨对虾存活率呈下降趋势;二溴海因对凡纳滨对虾的安全浓度随盐度的增加呈上升趋势。实验2和实验3研究了盐度、二溴海因浓度和饲料中碳水化合物水平对凡纳滨对虾生长和免疫的影响,结果表明:在低盐度养殖条件下,凡纳滨对虾长期生活于二溴海因环境中,可导致对虾处于应激状态,需要消耗体内较多的免疫因子,血清酚氧化酶和超氧化物歧化酶活性降低,生长速度下降,而在饲料中适量增加碳水化合物不仅可促进对虾生长又可起到饲料蛋白质节约作用。 关键词:二溴海因;碳水化合物;凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei);生长;免疫 近年来,随着凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)传统养殖模式难度的加大以及迎合对虾养殖向低盐度区域拓展的需要,凡纳滨对虾低盐度养殖面积迅速扩大。在对虾养殖过程中,人们常用化学消毒剂来预防和治疗虾病[1~3]。1,3-二溴-5,5-二甲基海因简称二溴海因,是一类新型的溴释放性消毒剂,对细菌繁殖体及芽孢、病毒、真菌和藻类等均有杀灭作用[4]。由于二溴海因具有性能稳定、绿色环保和对水生生物刺激小等优点,广泛应用于对虾养殖业。一般来说,每一种消毒剂对对虾都有一定程度的毒副作用,而对虾对消毒剂的耐受能力与其个体大小、营养生理状况、自身的渗透调节能力、免疫状况和水环境条件等因素密切相关[5,6]。然而,目前的研究大多集中于正常条件下消毒剂对对虾短期的急性毒性效应,而在低浓度条件下消毒剂对对虾长期的慢性毒性研究,尤其是消毒剂、营养因子和环境因子的交互作用对对虾生长和免疫影响的研究资料比较缺乏[2]。鉴于此,作者探讨了低盐度条件下,二溴海因和饲料中碳水化合物水平对凡纳滨对虾生长和免疫的影响。 1材料与方法 1.1实验饲料 实验所用饲料配方见表1。这些饲料是在能值基本相等的基础上碳水化合物设13.89%和41.76％两个水平(表2)。饲料制成直径为1.6 mm的颗粒,70℃下烘干,4℃冷藏保存。 1.2材料来源和淡化 实验共购两批对虾,第一批凡纳滨对虾平均湿体质量(0.062±0.024)g,购自连云港市海洋源育苗场,对虾在3个玻璃纤维水槽中暂养1周,然后每天以3的盐度分别降至20、5和0.2三个盐度水平,并适应3 d,然后进行急性和慢性毒性实验。第2批凡纳滨对虾平均湿体质量(7.144±0.529)g,购自连云港市海头对虾养殖场,对虾在两个玻璃纤维水槽中暂养一周,然后每天以3的盐度分别降至20和0.2两个盐度水平,并适应3 d,然后进行对虾免疫指标测定实验。玻璃纤维水槽规格200 cm×100 cm×80 cm,驯化起始盐度28,水温23.5～25.0℃。低盐度海水用过滤海水加自来水(盐度约为0.2)配制。 1.3急性毒性实验 实验采用单因素设计,设计梯度见表3至表5。每个水族箱(30 cm×40 cm×50 cm,养殖水体50 L) 放养10尾对虾,每个处理设3个重复,实验周期96h。水族箱中二溴海因浓度采用姜霞等[4]方法进行校正。实验期间,溶解氧维持在6.0 mg/L以上,pH7.7～8.2,水温(25.0±0.1)℃。 1.4慢性毒性实验 在急性毒性实验结果的基础上,慢性毒性实验采用3×3×2析因设计,每个水族箱(30 cm×40 cm×50 cm,养殖水体50 L)放养5尾对虾,每个处理设3个重复,共54个水族箱。实验前停食24 h,用电子天平称其初始体质量。实验期间,[(盐度:0.2、5和20)×(二溴海因质量浓度:0.0、0.3和0.6 mg/L)]9个水平均分别投喂A和B两种实验饲料(表6),日投饵两次(06:00和18:00时),过量投饵;投饵2.5 h后从每个水族箱收集残饵和粪便,70℃烘干后保存。为维持实验期间水族箱内所设二溴海因浓度的稳定性,每隔3 d,水族箱彻底换水一次,其他养殖条件控制同急性毒性实验,实验周期60 d。实验结束后,对每个水族箱中的对虾再次进行计数和称量。 1.5免疫指标测定实验 在急性和慢性毒性实验结果的基础上,对虾免疫指标测定实验采用2×2×2析因设计,每个水族箱(30 cm×40 cm×50 cm,养殖水体50 L)放养5尾对虾,每个处理设3个重复,共24个水族箱。养殖条件控制同慢性毒性实验,实验周期28 d。实验结束后,取每个水族箱中的对虾,用1 mL无菌注射器,按照血淋巴与抗凝剂(0.01 mol/L Tris-HCl,0.25 mol/L蔗糖,0.1