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第十三章
血栓与止血检验基本方法;教学要求
1.掌握PT时间、APTT 、3P试验、FDPs、血浆D-二聚
体等试验的检测的原理及临床意义、正常吸附血
浆、正常血清所含的凝血因子、过敏性紫癜、ITP
、DIC、Even综合征的概念及临床表现,过敏性紫
癜的主要过敏原、ITP的诊断标准,血友病诊断和
分型。
2.熟悉各型血友病及血管性血友病因子检测的意义、
血栓与止血筛选试验的应用,过敏性紫癜、ITP、
血友病、DIC、Even综合征的实验室检查。
3.了解血小板检测、抗凝血酶检测、血浆纤溶活性
检测和血栓前状态检测的意义、其他凝血障碍性
疾病的检验。;;;(一)血浆凝血酶原时间测定(PT)
1.原理
在受检血浆中加入足量组织凝血活酶(即TF)浸出液和和适量Ca2+离子后,血浆凝固所需的时间称为血浆PT。
;2.参考值
(1)平均为12s±1s,男性:11s~13.7s;
女性:11s~14.3s,超过对照3s以下为异
常。
(2)PT时间比值(PTR)=被检血浆PT(s) /正
常参比血浆PT(s),宜用多份正常血浆PT
的几何均数参考值为1.00±0.15
(3)国际标准化比值(INR)=PTR[S]
参考值因国际敏感度指数[S]而异。; INR:需先求得所用组织凝血活酶的国际敏感度指数[S],是所用组织凝血活酶与已知参比品相比较的一个参数。是用多份凝血因子水平不同的血浆(包括正常人和口服抗凝剂患者的血浆),用参比品测得它们的logPT,再用待标定的组织凝血活酶测得它们的logPT,以前者为纵坐标,后者为横坐标作图,经回归求得直线斜率。即待标定的组织凝血活酶的[S] =已知[S] ×斜率。[S]值越低,试剂对有关凝血因子降低的敏感度越高。再按下式求得INR: INR=PTR[S];3.临床意义:是外源性凝血途径的筛选试验。
(1)PT延长
①Vitk缺乏:Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ统称为依赖Vitk凝
血因子。Vitk↓、因子↓→ PT↑。
②抗凝治疗,香豆素类抗凝药物与Vitk化学结
构相似,竞争性拮抗,使PT↑。
③肝病:肝脏是合成除组织因子(Ⅲ)、钙(Ⅳ)
及Ⅷ因子外其他因子的主要场所,肝受损→凝
血因子合成↓→PT↑。
④先天性凝血因子缺乏症:Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ。
⑤???凝物质增多。
(2)PT缩短:常见于血栓前状态和血栓性疾病。
;(二)活化部分凝血活酶时间测定
1. 原理:37℃条件下,以白陶土激活因子Ⅻ和
Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板3
因子,在Ca2+参与下,观察贫血小板血浆凝固
所需的时间,即为活化部分凝血活酶时间
(APTT)。 ;2.参考值
男:37s±3.3s
女:37.5s±2.8s
超过正常对照10s以上为异常。
;3. 临床意义:是内源性凝血系统敏感而简便的筛
选试验。
(1)APTT时间延长:
①内源性凝血途径因子缺乏:Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ。
②外源性凝血途径因子缺乏:Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ。
③血中抗凝物质增多。
(2)APTT时间缩短:可见于高凝状态及血栓形成
性疾病。;三、纤溶活性的筛查试验
血浆纤溶活性增强的筛查,一般选用能直接或间接检测出血浆纤溶酶降解纤维蛋白(原)降解产物(FDPs)的试验,临床常用的有:凝血酶时间(thrombin time,TT)、血浆鱼精蛋白副凝固试验(plasma protamine pracoagulation test,3P test)。;(一)凝血酶时间测定
1.原理:受检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后、血浆凝固所需要的时间,即为凝血酶时间。
2.参考值:16s~18s。超过对照3s以上为异常。; 3.临床意义
(1)TT延长:
①肝素及肝素类抗凝物增多。
②FgDP(FbDP)↑→DIC(消耗Fb 或Fg)。
③先天性纤维蛋白(原)异常或缺乏症。
(2)TT缩短:极罕见,主要见于某些异常蛋
白血症如巨球蛋白血症。;(二)可溶性纤维蛋白单体试验:3P试验
1.原理:血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(plasma protamine paracoagulation test,3P test),是在待测血浆中加入硫酸鱼精蛋白,可使可溶性纤维蛋白单体(FM)与FDP(主要是X片段)形成可溶性复合物解离,游离的FM之间自行聚合呈肉眼可见的纤维絮状或
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