色谱分析之定性定量.pptVIP

* §21-6 定性、定量分析方法 一、定性分析 气相色谱分析法具有高的分离效能，但分离往往不是最终的目的，目的是要得到定性或定量的结果。气相色谱定性分析就是要确定试样的组成，即确定每个色谱峰各代表什么组分。气相色谱的定性能力总的来说是比较弱的。近年来由于气相色谱与质谱、红外光谱等联用技术的发展，使色谱分析的强分离能力和质谱、红外光谱的强鉴定能力相结合，为未知试样的分析开创了广阔的前景。现把几种常用的定性分析方法介绍如下： 1、利用已知物直接对照法定性 利用已知物直接对照定性，是一种简单可靠的方法，在具有已知标样的情况下，常使用该方法。该法定性的依据是：在一定柱条件（柱长、固定相）、操作条件下，组分有固定的保留值。 但也应注意：（A）相同的物质在相同条件下，有相同的保留值；（B）在相同条件下，有相同保留值的不一定是同一物质。 （1）利用保留值定性 如前所述，在一定的柱条件和操作条件下，准确测量未知物和已知物的保留值，若相同，则初步可认为它们属于相同物质。该法的缺点是保留值受操作条件影响大、载气流速、温度的微小变化都会使保留值改变，从而给定性带来困难。 （2）利用相对保留值定性 由于“r2/1仅受柱温、固定相的影响，而不受操作条件（如流速、柱长、填充情况等）的影响。因此在柱温、固定相一定时，“r2/1为定值，可作为定性的较可靠的参数。 （3）利用双柱或多柱定性 在一根色谱柱上用保留值鉴定组分有时不一定可靠，因为不同物质有可能在同一色谱柱上具有相同的保留值。所以应采用双柱或多柱法进行定性分析。即采用两根或多根性质（极性）不同的色谱柱进行分离，观察未知物和标准样品的保留值是否始终重合。如果仍获得相同的保留值，则定性结果一般就没有什么问题了。因为两种不同组分，在两根或多根不同极性固定液柱上，保留值相同之机会是极少的。 （4）利用已知物增加峰高法定性 如果样品组成复杂，峰间距小，且操作条件不易控制恒定时，峰高增加法是在此条件下最可靠的定性方法。具体方法是：先进一样品，得一色谱图，然后在样品中加入定量的标准已知物，同样条件下进样，从得到新的色谱图上看，如果某个峰加高了，则该峰就是加入的标准已知物的组分。 利用已知物直接对照法定性，方法简单，但试样的大概组成应该预先有所了解，而且还需准备对照用的已知纯物质。 2、利用保留指数定性 保留指数是一种重现性较其它保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直接与文献值对照而不需标准样品。 保留指数I是把物质的保留行为用两个紧靠近它的标准物（一般是两个正构烷烃）来标定。某物质的保留指数可由下式计算而得： 式中XN为保留值，可以用调整保留时间tR’、调整保留体积VR’或相应的记录纸的距离表示。 i为被测物质，Z，Z＋1代表具有Z个和Z＋1个碳原子数的正构烷烃。被测物质的XN值应恰在这两个正构烷烃的XN值之间，即XNZ＜XNI＜XN（Z+1）。 正构烷烃的保留指数则人为地定为它的碳数乘以100，例如正戊烷、正已烷、正庚烷的保留指数分别为500、600、700． 欲求某物质的保留指数，只要与相邻的正构烷烃混合在一起（或分别的），在给定条件下进行色谱实验，然后按上式计算其保留指数。 现以乙酸正丁酯在阿皮松L柱上，柱温为100℃时的保留指数为例来加以说明。选正庚烷、正辛烷两个正构烷烃，乙酸正丁酯的峰在此两正构烷烃峰的中间。 设相当于调整保留时间的记录纸距离为： 正庚烷（n-C7）XNZ＝174.0mm log174.0＝2.2406 乙酸正丁酯 XNi＝310.0mm log310 = 2.4914 正辛烷(n-C8）XN(z+1)＝373.4mm log373.4＝2.5722 Z＝7，将上述数据代入上式得： 保留指数的有效数字为三位，其准确度和重现性都很好，误差＜1％，因此只要柱温和固定液相同，就可用文献上发表的保留指数进行定性鉴定，而不必用纯物质。 3、与其它方法结合的定性分析法 （1）与质谱、红外光谱筹仪器联用 较复杂的混合物经色谱柱分离为单组分，再利用质谱、红外光谱或核磁共振等仪器进行定性鉴定。其中特别是气相色谱和质谱的联用，是目前解决复杂未知物定性问题的有效方法之一。 （2）与化学方法配合进行定性分析 带有某些官能团的化合物，经一些特殊试剂处理，发生物理变化或化学反应后，其色谱峰将会消失或提前或移后，比较处理前后色谱图的差异，就可初步辨认试样含有哪些官能团。使用这种方法可直接在色谱系统中装上预处理柱。若反应过程进行较慢可进行复杂的试探性分析，也可使试样与试剂在注射器内或者其它小容器内反应，再将反应后的试样注入色谱柱。 4、利用检测器的选择性进行定性分