光遗传技术调控新生神经元电活动对颅脑损伤小鼠认知功能的.pdfVIP

第３５卷　第１０期 新乡医学院学报 Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１０ ·８５８· 　 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 　 ２０１８年１０月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｃｔ．２０１８ 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉 欁 氉 本文引用：夏天光，孔宪斌，王明丽，等．光遗传技术调控新生神经元电活动对颅脑损伤小鼠认知功能的影响 欁 欁 【基础研究】 欁 ［Ｊ］．新乡医学院学报，２０１８，３５（１０）：８５８８６４．ＤＯＩ：１０．７６８３／ｘｘｙｘｙｘｂ．２０１８．１０．００４． 氉欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉 光遗传技术调控新生神经元电活动对颅脑损伤小鼠认知功能的 影响 １ １ １ ２ １ ３ ３ ３ １ １ 夏天光 ，孔宪斌 ，王明丽 ，毕　莹 ，吕方方 ，梁　军 ，姜　伟 ，孙　倩 ，董化江 ，李晓红 （１．武警后勤学院附属医院脑创伤与神经疾病研究所，天津　３００１６２；２．武警后勤学院附属医院心脏科，天津　 ３００１６２；３．天津大学精密仪器与光电子工程学院，天津　３０００７２） 摘要：　目的　探讨光调控去极化对颅脑损伤（ＴＢＩ）小鼠海马齿状回（ＤＧ）新生神经元的存活、成熟及认知功能 的影响。方法　将６６只雄性Ｃ５７ＢＬ／６小鼠随机分为假手术组（ｎ＝１０）、ＴＢＩ组（ｎ＝１２）、ＴＢＩ＋增强型绿色荧光蛋白 （ＥＧＦＰ）组（ｎ＝１２）和ＴＢＩ＋视紫红质通道蛋白２（ＣｈＲ２）组（ｎ＝３２）；假手术组小鼠行单纯开颅手术，未行液压冲击； ＴＢＩ组小鼠给予液压冲击制备ＴＢＩ模型；ＴＢＩ＋ＥＧＦＰ组小鼠给予液压冲击制备ＴＢＩ模型后感染慢病毒 ＤＣＸＥＧＦＰ； ＴＢＩ＋ＣｈＲ２组小鼠给予液压冲击制备ＴＢＩ模型后感染慢病毒ＤＣＸＣｈＲ２ＥＧＦＰ。各组小鼠均于造模后连续７ｄ行腹腔 －１ 内注射ＢｒｄＵ（１００ｍｇ·ｋｇ ）。免疫荧光染色检测造模后７、２８ｄＴＢＩ组小鼠海马ＤＧ区新生神经元存活和成熟情况； 倒置荧光显微镜观察假手术组和造模后不同时间点（３、５、７、９、１２、１８、２８ｄ）ＴＢＩ＋ＣｈＲ２组海马ＤＧ区ＤＣＸＥＧＦＰ阳性 新生神经元变化；造模后２１～２６ｄ进行水迷宫实验检测各组小鼠认知能力；造模后２８ｄ采用免疫荧光染色检测ＴＢＩ 组、ＴＢＩ＋ＥＧＦＰ组和ＴＢＩ＋ＣｈＲ２组小鼠海马 ＤＧ区表达ＤＣＸ神经元的存活和成熟情况。结果　造模后２８ｄ，ＴＢＩ组 小鼠海马ＤＧ区新生成熟神经元数量显著少于造模后７ｄ（Ｐ＜０．０１）。造模后３、１８、２８ｄ，ＴＢＩ＋ＣｈＲ２组与假手术组小 鼠海马ＤＧ区ＤＣＸＥＧＦＰ阳性新生神经元数量比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；造模后５、７、９、１２ｄ，ＴＢＩ＋ＣｈＲ２组 小鼠海马ＤＧ区ＤＣＸＥＧＦＰ阳性新生神经元数量均显著高于假手术组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。造模后９ｄ，ＴＢＩ＋ＣｈＲ２ 组小鼠海马ＤＧ区ＤＣＸＥＧＦＰ阳性新生神经元数量均显著高于其他各时间点（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。造模后２１ｄ，４组 小鼠寻找隐匿平台的潜伏期比较差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。造模后２２～２６ｄ，ＴＢＩ组和ＴＢＩ＋ＥＧＦＰ组小鼠寻 找隐匿平台的潜伏期均显著长于假手术组（Ｐ＜０．０１）；ＴＢＩ＋ＣｈＲ２组与假手术组小鼠寻找隐匿平台的潜伏期比较差 异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；ＴＢＩ＋ＥＧＦＰ组与ＴＢＩ组小鼠寻找隐匿平台的潜伏期比较差异无